PEI转染试剂常见问题

Q：C4058L1080和C4058L1090有什么区别？

A：我们有两种，80是针对线性的，90是支链转染，比如慢性病包试剂用90比较好。  

Q：李记细胞转染液和PEI固体自行配制溶液相比的优势在哪里？

A：很多客户买固体很难把握的，固体非常不容易溶解，包装比较大，用的不多建议您选液体的，已做无菌处理，可以直接使用。

Q：接种细胞，必须用胶原酶消化？胰酶不能用么？

A：胶原酶从细菌中提取出来的酶，对胶原有很强的消化作用，适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织，它对细胞间质有较好的消化作用，对细胞本身影响不大，可使细胞与胶原成分脱离但不受伤害。胶原酶消化的不是细胞表面，而是细胞间质。

         胰酶消化作用于与赖氨酸或精氨酸相连接的肽腱，除去细胞间粘蛋白及糖蛋白，影响细胞骨架，从而使细胞分离。对细胞有轻微影响，进而影响后续转染效率及细胞活性，在一定程度上体现为转染试剂的毒性。

Q：使用方法提到，转染细胞时将复合物（40ul质粒稀释液+40ul 转染试剂稀释液）滴入到含细胞的培养皿中。此时含细胞的培养皿里面有含血清的培养基么？如果有，体积是多少？以24孔板为例，是0.5ml么？

A：培养皿中培养基成分为正常培养细胞的成分，原来培养时有血清，那就有。培养孔中培养液的体积也是正常情况，你说的对，如果是24孔板，那么体积应该是0.5ml

Q:转染细胞步骤中提到，去除含复合物的培养液之后呢？要加含血清的培养基么？加多少，以24孔板为例？加完培养基后继续培养？培养多久？

A:去除含复合物的培养基，过程是逐步的，有两个目的，一是尽可能提高转染效率，二是尽可能降低细胞毒性。减少EZ Trans-DNA复合物的过程，也是恢复到细胞正常培养基成分的过程。后续培养多久，说明书为建议时间，你可以通过实验摸索，要根据你的转染效率，基因表达情况确定。

Q:转染细胞步骤中提到，这里的7h，指的是去除含复合物的培养液换成含血清的培养基之后的7h，还是指加入复合物后转染7h?- 同样的，“24-48小时内检测转染效率”指的是去除含复合物的培养液换成含血清的培养基之后的24-48h，还是指加入复合物后转染24-48h？

A:所有时间都是从EZ Trans-DNA复合物与细胞接触开始算.