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PicoGreen荧光染料可对DNA样品进行定量

更新时间:2019-09-10      点击次数:3181
 
  PicoGreen荧光染料法是一种灵敏的双链DNA检测方式,通过Modulus检测仪可以检测到pg级的微量DNA。这种方法主要用来测定微量的DNA残留,或对DNA样品进行定量。
  作为DNA染色剂之一的PicoGreen荧光染料特异性地与样品中双链DNA结合,产生荧光信号。PicoGreen技术可以检测到低达0.5纳克双链DNA的变化。DNA的微量增加引起荧光信号强度或相对荧光单位(RFU)的显著增加。其自发荧光忽略不计,重复性标准差异低,不受样品化学成分的干扰。
  Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料,常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建,DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义。疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。
  Picogreen仅在与DNA双链结合后才发出荧光,且所产生的荧光与DNA浓度呈正比,在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下,可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性,且几乎无序列依赖性,可以地测量多个来源的DNA,包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。可用荧光分光光度计或荧光酶标仪读数,Ex/Em=480nm/520nm。
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