带你了解细胞凋亡检测试剂盒的知识
更新时间:2021-04-19 点击次数:1137
细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。形态学检测是研究细胞凋亡的基本方法。细胞凋亡的形态学变化是多阶段的,起初,细胞间连接和微绒毛消失,细胞体积缩小,胞浆凝缩,内质网变疏松并与胞膜融合,形成一个个空泡,核糖体与线粒体等细胞器聚集,结构尚无明显改变,细胞核内的染色质逐渐凝聚成新月状附在核膜周边,细胞核固缩呈均一的致密物,进而断裂成碎块,此时细胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不断出芽、脱落,一个细胞变成数个大小不等的有膜包裹的凋亡小体:最后凋亡小体被周围具有吞噬能力的细胞吞噬、消化。上述这些形态学的变化,可以通过本试剂盒中的染色及光学显微镜观察。
细胞凋亡的一个显著特点是细胞染色体DNA的降解,这是一个较普遍的现象。这种降解非常特异并有规律,所产生的不同长度的DNA的片段约为180bp-200bp的整数倍,表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现特异的梯状Ladder图谱,EZ640TUNEL
细胞凋亡检测试剂盒(远红荧光)试剂盒采用TUNEL法,应用末端脱氧核糖核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)在凋亡细胞断裂DNA的3´-OH末端催化掺入EZ640-dUTP。EZ640-dUTP标记的DNA可以用荧光显微镜直接观察或者用流式细胞仪定量。TUNEL法可以选择性的检测凋亡细胞,而非坏死细胞或因辐照和药物治疗而造成的DNA链断裂的细胞。TUNEL实验中,TdT酶催化dUTP掺入断裂的DNA链的3´-OH末端。抗原标记的dUTP(如digoxin-dUTP、生物素-dUTP),因为它可以直接进行原位检测,是一种更快速、直接的检测手段。