慢病毒的感染效率受哪些因素影响？

   慢病毒是一种有包膜的RNA病毒，直径为80-120nm，呈二十面体对称结构、球形。病毒颗粒最外层是包膜(包膜蛋白决定了感染细胞的类型)，再往里依次为基质蛋白和衣壳，最里面是两条相同的正股RNA链和酶(逆转录酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒感染的显著特点是感染个体在出现典型的临床症状之前，大多经历长达数年的潜伏期，之后缓慢发病，因此这些病原体被称为慢病毒。慢病毒包装系统一般由慢病毒表达载体和慢病毒包装载体组成。而慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的慢病毒载体所需要的所有辅助蛋白。

　　慢病毒感染效率受到多种因素的影响，首先，考虑病毒包装制备是否存在问题，比如外源基因是否正确，病毒滴度是否合格等。其次，考虑病毒运输和保存方式是否得当，解冻病毒一定要在冰上进行，避免反复冻融，否则会影响病毒滴度；-80℃保存半年以上需要重新测定滴度。细胞状态对于慢病毒转导效率也具有很大的影响，良好的生长状态是达到高感染效率的保证，一般选择细胞形态较好、轮廓清晰、处于对数生长期的细胞进行感染可提高感染效率。临床慢病毒转导用途关于慢病毒转导的临床实验。

　　基因治疗的临床效果取决于细胞的高水平转导,虽可通过二次转导或提高感染复数(multiplicityofinfection,MOI)增加转导率,但延长体外培养时间可诱导干细胞进入细胞周期而影响其分化增殖能力;提高gan ran复数会提高插入突变风险和增加生产成本。因此,在不断改造慢病毒以增加安全性的同时,提高病毒转导效率是亟待解决的难题。慢病毒转导过程的限制因素包括病毒黏附、入胞、细胞运输及固有免疫作用。通过引入异源病毒包膜构建新的伪型载体和/或在转导过程中添加病毒转导增强剂(transductionenhancers,TEs),可有效克服LVVs转导的障碍,增加转导细胞比例,从而达到临床需要的转导水平。