Western Blot (WB) 是分子生物学中常用的一种技术,主要用于检测特定蛋白在样本中的存在与表达水平。封闭液的主要作用是阻止一抗和二抗的非特异性结合,这对于减少背景噪音、提高信号对比度至关重要。没有适当的封闭,即便是最jing细的实验设计也可能因高背景信号而受到影响,导致数据解读困难。
快速封闭液介绍
快速封闭液(即用型,免洗)是一款无蛋白成分快速 Western Blot 的封闭液,可用于高效快速的封闭转膜后的 NC 或 PVDF 膜,可替代脱脂奶粉、BSA 等传统封闭液,通用于常规抗体、磷酸化抗体、生物素标记抗体。其次整个封闭过程仅需10min,无需洗涤,即可直接孵育一抗;总体效果xian著优于传统的基于牛血清白蛋白、脱脂奶粉、酪蛋白 等的封闭液及国外同类产品。
快速封闭液特点
✔ 即用型封闭液,无需配制
✔ 封闭时间短,仅需10分钟
✔ 背景低,信噪比高,优于常规封闭的效果
✔ 不含哺乳动物来源的蛋白,适用于磷酸化的抗体
快速封闭液实验步骤
① 完成转膜后,用Western洗涤液洗涤蛋白膜1-2 min 。
② 根据膜的大小,将一定体积的快封液倒入平皿或者其它适当容器中,确保封液后续能充分覆盖膜即可。对于常规的 western,一张约 6.6×8.5cm 的膜推荐使用约 10mL 左右的快封液。
③ 用平头镊夹住膜的一角,将膜放置在 WB 无蛋白封闭液(1 X in TBST)中,使封闭液浸没膜,置于水平摇床上封闭约 10 min(经多种抗体的测试封闭 10 min的效果很多时候会显著优于常规的BSA封闭1 h的效果)。
④ 封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续实验。
快速封闭液产品推荐
[品牌] 和元李记生物
[产品] 快速封闭液(即用型,免洗)
[货号] AP36L108
[规格] 500mL
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