PikoOrange 蛋白定量试剂盒 使用说明书

文件下载    图片下载    

PikoOrange蛋白定量试剂盒

产品描述

PikoOrange Protein Quantitation Kit是一个高度敏感的基于荧光技术定量纯化蛋白质的试剂盒，其检测蛋白浓度范围为0.1-15 ug/ml。比起传统定量方法如BCA、Bradford或Lowry蛋白定量分析，PikoOrange蛋白定量试剂盒敏感性更佳，此外，与NanoOrange蛋白质定量测定技术相比具有更加的线性和重现性。PikoOrange蛋白定量试剂盒可显示不同蛋白质之间的zui小变异性，且荧光信号稳定长达16小时；其受测样本不论为纯化蛋白或抗体皆适用。

需特别注意的是，PikoOrange对盐类、缓冲液、去垢剂或是其他化学物质都有不同程度的耐受性（表2）。

                            图1：PikoOrange比NanoOrange有更好的线性和重现性

产品组分

技术参数

Ex/Em 480/598 nm （结合BSA）。

运输和保存方法

室温保存，不要冷藏PikoOrange缓冲液。PikoOrange Dye需避光保存，产品可稳定保存至少12个月。如果缓冲液出现沉淀，可加热到37℃并漩涡溶解。如果长时间不用，组分C应避光保存在4℃。

使用方法

1、准备1x PikoOrange缓冲液: 1:10 稀释10x缓冲液在dH2O。例如，添加1 mL10x 缓冲液至9 mL dH2O. 1 x PikoOrange缓冲液可以储存在室温下。

2、使用前准备PikoOrange工作液：将500xPikoOrange染料按1:500用1x PikoOrange缓冲液稀释。例如，添加10 uL 500xPikoOrange染料值5 mL 1x PikoOrange缓冲液。

注意：您将需要大约3 mL工作液制作标准曲线（见表1)以及每孔检测样品250 ul工作液。

3、准备未知样本：10 uL 样本添加 250 uLPikoOrange工作液。

注意：您可能需要稀释未知样本的得到不同浓度的样本。样品稀释可能会减少干扰物质的影响。

4、准备一个蛋白质标准曲线所需的BSA浓度，如表1所示。

5、样本和标准蛋白加热至90- 95℃ 10分钟，此过程需避光操作。

6、取出样本室温避光放置20分钟冷却。短时间离心以收集全部样本。

7、每个标准样品或未知样品取200 uL转移到96孔酶标板，荧光酶标仪读数。激发/发射波长为480/598 nm。

注意：另外，样品可以被转移到荧光试管使用荧光仪测量。如果需要超过200 uL体积测量，等比例放大配置方案。

表1：准备BSA样品制作标准曲线

表2：PikoOrange对不同化学物质的耐受性