高保真DNA聚合酶的保真性，极为出色的保真度，比Taq酶高50倍。可靠性，高特异性和产量，且优化极少。覆盖度，各种扩增子上的性能（从高AT到高GC）速度，短的延伸时间。扩增子长度 – 20 kb简单模板和10 kb复杂模板的可靠扩增。为此，NEB推出了Q5。据称，这种高保真DNA聚合酶的保真度比普通的Taq酶高50倍，导致扩增产物的错误率极低。为什么会这么高，这是因为聚合酶与Sso7d DNA结合结构域融合，从而改善了保真度、速度和性能可靠性。
高保真DNA聚合酶除具有对引物，末端不配对碱基进行错配修复功能外 ,对远离，末端至数个碱基位点的错配碱基也能进行错配修复。回答有关非末端不配对碱基对上述聚合反应“关”系统的影响 ,对深入认识高保真酶的保真机制和开发此“关”系统的相关技术 ,具有一定的理论和应用价值。我们采用非末端不配对的硫化修饰引物 ,研究其对不同保真度 DNA聚合酶引物延伸反应的影响 ,以观察非末端的错配碱基能否“关”闭高保真 DNA聚合酶介导的聚合反应。具有外切酶活性的高保真酶的这一维持高保真度的新机制 ,已被不同设计方案的实验所证实 ,包括应用远离三末端的不配对碱基的引物及三末端耐外切酶的引物。这一新的“关”的机制 ,不但更新和完善了高保真聚合酶的工作原理 ,更为重要的是 ,这一“关”的效应在与耐外切酶消化的硫化磷酸修饰的碱基特异性引物联合时 ,构成了一种对SNP具有高度辨认能力的复合分子开关系统。
高保真DNA聚合酶是细胞复制DNA的重要作用酶，以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。高保真DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、 引物、dNTP 等的情况下）及其相辅的活性。在引物RNA'-OH末端，以dNTP为底物，按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸。酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。可能使酶的构象发生变化，促进3'-OH与5'-PO4结合生成 磷酸二酯键。若是错误的核苷酸进入结合位点，则不能与模板配对，无法改变酶的构象而被3'-5'外切酶活性位点所识别并切除之。
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