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品牌 | 其他品牌 | 货号 | AC14L313 |
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规格 | 100tests | 供货周期 | 现货 |
应用领域 | 生物产业 |
产品描述
高尔基体是大多数真核细胞胞质内囊泡和折叠膜的复合体,参与分泌和细胞内运输。它修饰内质网(ER)中内置的蛋白质和脂质,并准备将其输出到细胞外。它还在脂质在整个细胞中的运输和溶酶体的形成中起着重要作用。
Smart Cell NBD 神经酰胺高尔基染色试剂盒提供了一种简便,快速的方法,可以选择性地对活细胞或醛固定细胞中的高尔基染色。将 C6 NBD 神经酰胺与牛血清白蛋白(C6-NBD-Ceramide-BSA)形成复合物给予细胞。高尔基体通过形成相应的荧光代谢产物而被染色。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
SmartCell神经酰胺高尔基体染色试剂盒Green | AC14L313 | 100tests | 2980 |
产品组分
组分 | 数量 |
组分 A:C6 NBD Ceramide | 1 vial |
组分 B:Staining Buffer | 1 bottle (25 mL) |
组分 C:DMSO | 1 vial (200μL) |
组分 D:Hoechst33342 | 1 vial (50μL) |
运输与保存
蓝冰运输。-20℃避光保存,有效期12个月。
使用方法
简要概述
1.根据需要处理细胞。
2.加入 C6 NBD 神经酰胺工作溶液,在室温或 37℃ 下孵育 15-30 min。
3.更换染色缓冲液,在室温或 37℃ 下孵育 15-30 min。
4.使用 FITC 滤镜套件在显微镜下观察。
5.可选:用 4%甲醛固定细胞。
溶液配制
1.储备溶液配制
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在 -20℃ 下,避免重复冻融循环。
C6 NBD 神经酰胺储备溶液(100X):将 100 µL的DMSO(组分 C)加入小瓶 C6 NBD 神经酰胺(组分 A)中并充分混合。【注】:将未使用的 C6 NBD 神经酰胺原液在 -20℃ 保存,避免冻融循环。
2.工作溶液配制
C6 NBD 神经酰胺工作液:将 10 µL的NBD 神经酰胺原液(100X)添加到 990 µL的染色缓冲液(组分 B)中,制成 NBD 神经酰胺工作液。
可选:将 10 µL的Hoechst 33342(组分 D)添加到 1mL的NBD 神经酰胺工作溶液中以进行核染色。
操作步骤
1. 根据需要处理细胞。
2. 直接在细胞培养基中加入 100µL的C6 NBD 神经酰胺工作溶液。
3. 在室温或 37℃ 下孵育 15-30 min。
4. 除去 C6 NBD 神经酰胺工作溶液,并用 100 µL /孔的染色缓冲液(组分 B)代替。
5. 在室温或 37℃ 下孵育 15-30 min。
6. 在装有 FITC 滤光片的荧光显微镜下观察。
7. 从步骤 4 中除去染色缓冲液,然后向每个孔中添加 100 µL /孔/ 96 孔板的 4% 甲醛固定缓冲液(未提供)。【注】:对于非贴壁细胞,请添加所需量(例如 2X106细胞/ mL)的 4%甲醛固定液。(可选)
8. 在室温下将平板孵育 20-30 min,去除固定剂。用 PBS 洗涤细胞 2-3 次,然后用 100 µL /孔的染色缓冲液(组分 B)替换。(可选)
注意事项
本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
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