您好!欢迎访问和元李记(上海)生物技术有限公司网站!
咨询热线

18616108315

当前位置:首页 > 产品中心 > 细胞生物学 > 细胞转染 > AC04L051、AC04L052EZ Trans siRNA转染试剂

EZ Trans siRNA转染试剂

简要描述:EZ Trans siRNA转染试剂,是一种基于阳离子高分子聚合物开发的新型转染试剂,适用于siRNA 及microRNA (miRNA) 的转染。

  • 产品型号:AC04L051、AC04L052
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-09-19
  • 访  问  量:2077

详细介绍

品牌其他品牌货号AC04L051、AC04L052
规格300uL、1mL供货周期现货
应用领域化工,生物产业,综合

产品描述

EZ Trans siRNA转染试剂,是一种基于阳离子高分子聚合物开发的新型转染试剂,适用于siRNA 及microRNA (miRNA) 的转染。本产品能在多种常见细胞中实现高效率、低毒性的转染效果,且具有操作简便,重复性佳等优点,适用于 siRNA或miRNA 介导的基因抑制实验。

订购信息

产品名称

货号

规格

EZ Trans siRNA转染试剂

AC04L051

300 uL

EZ Trans siRNA转染试剂

AC04L052

1 mL

运输与保存

蓝冰运输。4℃保存,有效期 6个月;-30℃至-10℃保存,有效期12个月。注:避免反复冻融。

使用方法(以 24 孔板为例,其他培养皿中转染请参考表 1)

1. 接种细胞

对于贴壁细胞:转染前一天,将细胞按照每孔1-2x10^5个细胞的量进行铺板,使其在转染时密度为60%-80% 为佳。

对于悬浮细胞:转染当天,配制转染试剂-核酸复合物之前,用PBS清洗细胞1-2次,用250 μL Opti-MEM I 减血清培养基 (无血清) 重悬细胞,在24孔板中进行细胞铺板,细胞密度为60-80%。

2. 准备转染试剂-siRNA复合物(或转染试剂-miRNA复合物)

(1)  对于每孔细胞,取2 μLsiRNA (20 μM,DEPC水溶解)加入到1.5mL离心管中,加入2 μL转染试剂与siRNA 混合,室温孵育3 min。

(2)  往上述混合物中加入100 μL Opti-MEM I减血清培养基(无血清),轻轻混匀,在室温下静置30 min,形成转染试剂-核酸复合物。

(3)  30 min后,往上述复合物中加入250 μLOpti-MEM I减血清培养基(无血清),轻轻混匀。

3. 转染细胞

(1)  细胞用PBS清洗1-2次,将上述350µL转染试剂-siRNA复合物加入每孔细胞。

(2)  在 37℃,5% CO2 培养箱培养 24-48 h,无需更换新的培养液,之后即可检测基因干扰效果或者后续功能实验。可在转染 12h 后补充 150μL 培养基 (含血清),总体积达到 500μL,即达到常规的培养皿使用培养液的量。

注意事项

1.    本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

2.    小RNA(siRNA/miRNA)质量:请务必使用高纯度无内毒素转染级RNA。

3.    整个实验过程使用无RNA酶和无热原性的材料,如离心管、枪头、缓冲液。

4.    细胞条件:细胞状态会极大影响转染效率,待转染细胞应处于良好生长状态,建议使用生长处于指数期、存活率大于90% 的细胞进行转染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。

5.    细胞培养液要求:EZ Trans 细胞转染试剂可用于有血清培养基的转染,并且转染前后不需要换培养基。

6.    由于某些特殊培养基中的成分可能会抑制阳离子聚合物介导的转染,因此建议测试这些培养基与本产品的相容性,以确保最佳转染效果。

7.   细胞类型、基因特性、siRNA/miRNA的效力、靶mRNA的半衰期和靶蛋白的周转率等因素都会影响siRNA/miRNA介导的基因敲低效果。

8.   建议siRNA/miRNA工作浓度在10-100nM之间,转染试剂的体积应根据siRNA/miRNA浓度和培养皿的大小进行调整,请参见表1。

表 1:不同培养体积对应的待转siRNA/miRNA、 EZ Trans、稀释液用量

培养器皿

培养液体积

(mL)

RNA (20 μM )

(μL)

转染试剂

(μL)

Opti-MEM   I培养基a

(μL)

Opti-MEM   I培养基b

(μL)

96 孔板

0.1

0.4

0.4

20

50

24 孔板

0.5

2

2

100

250

12 孔板

1

4

4

200

500

6 孔板

2

8

8

400

1000

60 mm 培养皿

4

16

16

800

2000

100 mm 培养皿

10

40

40

2000

5000

注:该表使用量仅供参考,具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。a: 稀释转染试剂-RNA复合物所需培养基的量;b: 加入转染试剂-RNA复合物的培养基的量。

相关产品推荐

CCK-8试剂盒(Cell Counting Kit-8)(货号:AC11L054)

EZ Trans细胞转染试剂(高效)(货号:AC04L092)

本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。




产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
微信咨询
地址:上海市浦东新区紫萍路908弄 传真:021-50724961
©2024 和元李记(上海)生物技术有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备2023007219号-1