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| 品牌 | Life-iLab/李记生物 | 货号 | AC15L016 |
|---|---|---|---|
| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,综合 |
产品描述
小麦胚芽凝集素， AF647标记（下文简称“AF647 WAG"）， 是一种与N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸结合的凝集素，可能是明亮和绿色荧光中最亮的WGA缀合物。它是目前研究多、应用广泛的一类凝集素。由于WGA与糖缀合物结合，其衍生物和缀合物被广泛用于标记细胞膜和纤维化瘢痕组织，用于荧光成像和分析。WGA的糖结合特异性与β-1,4-GlcNAc-连接残基的序列，即几丁质酶有关。每个单体包含两个相同的非相互作用的结合位点，它们与3或4β-1,4-GlcNAc单元互补。在所检测的单糖中，只有GlcNAc与WGA结合。甘露聚糖不结合，而GalNAc只能弱结合。WGA与含有Galβ（1--4）GlcNAcβ（1--3）重复序列（即聚乳糖胺型聚糖）的大寡糖中的内部GlcNAc残基具有高亲和力结合。N-乙酰神经氨酸只参与与WGA的低亲和力相互作用。WGA显示了复杂的糖类特异性模式，可用于复杂碳水化合物的结构分析。
技术资料
Ex (nm)： | 656 | Em (nm)： | 670 |
分子量： | N/A | 溶剂： | Water |
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
小麦胚芽凝集素，AF647标记 | AC15L016 | 1mg |
运输与保存
蓝冰运输。-20℃避光防潮保存，有效期12个月。
适用仪器
荧光显微镜 | |
激发： | Cy5滤波片 |
发射： | Cy5滤波片 |
推荐孔板： | 黑色透明 |
使用方法
溶液配制
1. AF647 WAG储备溶液（200X）配制
将 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的储备溶液。【注】：重新配制的储备溶液可在 4℃ 下短期储存，或在 -20℃ 下长期储存。
2. AF647 WAG工作溶液（1X）配制
将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。【注】：不同细胞系的优化染色浓度可能不同。活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。
操作步骤
1. 活细胞染色
(1) 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
(2) 添加 100 µL AF647 WAG 工作溶液。
(3) 将细胞与AF647 WAG 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 min。
(4) 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
(5) 使用 FITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。
2. 固定细胞染色
(1) 在PBS中使用4％的甲醛固定细胞。【注】：对于固定细胞膜染色，建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色，如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。
(2) 添加 100 µL AF647 WAG 工作溶液。
(3) 在室温下用AF647 WAG 工作溶液孵育细胞 10-30 min。
(4) 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。
(5) 使用 FITC 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。
图示
图 1. 使用AF647 WAG 以 5 µg/mL的浓度在活细胞（Hela细胞） 染色 30 min，然后用 Hoechst 33342（Cat# AC12L021）染色。最后使用带Cy5和DAPI 滤光片组的荧光显微镜成像。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。
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