脂质过氧化传感器 （Lipid Peroxidation Sensor）

产品描述
脂质过氧化 传感器 （Lipid Peroxidation Sensor）是一种新型的对Lipid ROS 高选择性、高灵敏的脂质过氧化 传感器，与其他ROS捕获探针不同之处在于，C11-BODIPY 581/591 具有好的亲脂性可以快速入膜，随后可以选择性的对细胞内和细胞膜中的脂质过氧化(Lipid ROS)进行捕获，并在氧化后仍保持亲脂性，不会离开脂质膜，该过程同时伴随荧光信号变化。多用于荧光显微镜、流式细胞分析等对Lipid ROS 的可视化监测。
脂质过氧化 传感器结构中多不饱和丁间二烯基在Lipid ROS 催化氧化后，其荧光发射峰从590 nm偏移至510 nm。
订购信息

运输与保存
蓝冰运输。-20℃保存，有效期36个月。
使用方法
一、样品溶解
商品开封后，离心机轻甩；随后加入适量DMSO 进行溶解，溶解度至少可达25mg/mL。溶解后建议分装 -20℃ 避光保存，尽量避免反复冻融，防止吸潮。【注】：样品轻甩目的是为了避免痕量的探针吸附管壁损失样本。
二、样品使用
1.  流式细胞分析：

1. 悬浮细胞：800 g 离心5 min 收集细胞沉淀；随后PBS 洗涤细胞两遍。

2. 贴壁细胞：弃培养液，用常温PBS 或培养液轻洗细胞2 次，随后胰*消化，800g 离心5 min 收集细胞沉淀，随后PBS 洗涤细胞两遍，每个样本收集1~5 ×10⁵ 个细胞。【注】：操作过程中轻柔吹打细胞，消化时间不宜过长，剧烈吹打或胰*消化过度会影响实验结果。

3. 脂质过氧化 传感器用于脂质过氧化检测的推荐浓度为终浓度5μM；配制方法：用新鲜空白培养液配制终浓度为5μM 的脂质过氧化传感器染色液待用，DMSO 含量≤5‰。【注】：该步操作建议在消化细胞前准备好，以免细胞消化后久置影响实验结果。

4. 将事先配置好的脂质过氧化染色液加入收集的细胞沉淀中，推荐体积为500μL，随后置于37℃孵箱，染色30min，期间5-10min 间隔轻弹细胞使其悬浮保证染色更充分。

5. 染色结束后，800 g 离心5 min，弃上清，随后用PBS 清洗细胞2 次，加入200μLPBS 重悬细胞用于流式分析。

2.  原位成像：

1. 接种适当密度的细胞于20mm 规格的盖玻片上（也可用共聚焦小皿替代），给予实验药物处理适当时

2. 间后，吸去培养液，用PBS 洗涤细胞一遍；加入500 μL 配制好的脂质过氧化染色液，于37℃染色30min；配制方法参考流式分析中的染色液配制。

3. 弃培养液，PBS 洗涤细胞两遍后于荧光显微镜或激光共聚焦下进行成像检测。细胞在染色后应在1 h之内完成检测。

3.  检测条件：
该分子探针在还原状态下最佳激发波长为581 nm, 发射为591nm；被Lipid ROS 氧化后最佳激发波长
为500 nm，发射在510nm。因此，在流式分析中检测通道为FL1-A；激光共聚焦检测：氧化态激发波长可
选488nm（FITC）通道；还原态激发波长可选561 nm（TRITC）通道。
注意事项

1. 本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

2. 使用前小心离心数秒取用，需佩戴手套操作，注意避免与皮肤、眼睛和黏膜接触。

3. 本试剂盒可用检测活细胞中Lipid ROS 水平，用于评价细胞铁死亡状态。

4. 流式分析效果图、原位成像图详见官。

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