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  • 不接触染料也能进行DNA电泳的分析

    2017-02-24 问:您是否为EB有毒,安全染料贵的问题而烦恼?答:试试李记生物的DNA电泳套装吧!图1:I、Hela细胞与EB,李记套装的上样buffer及李记GelRed在室温下孵育一小时,用Olympus荧光显微镜观察并拍照,与EB孵育的细胞显示出绿色荧光,表明染料已透过细胞膜进入细胞并与核酸结合。李记套装的上样buffer及李记GelRed未显示荧光,说明李记染料未能透过细胞膜进入细胞。II、EB,李记套装的上样buffer及李记GelRed染料相同DNA浓度下染色效果。李记生物的DN...
  • 细胞冻存和复苏经验总结

    2016-11-29 细胞冻存过程对保持细胞状态影响巨大,李记生物结合多年实践,总结出如下实用的细胞冻存流程。“慢冻快融”是细胞冻存及复苏的基本原则,这对zui大限度的保存细胞活力至关重要。目前细胞冻存多用甘油或二甲基亚砜(DMSO)作为保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性;细胞冻存和复苏时,减少细胞内冰晶产生是关键。缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少冰晶对细胞的物理损伤。复苏细胞采用快速融化的方法可以保证细胞外结晶在很短的时间内融化,避免由于缓慢融化使水分渗...
  • 高分辨率熔解曲线(HRM)分析指南

    2016-10-10 HRM(HighResolutionMeltinganalysis,高分辨熔解曲线)同许多荧光PCR技术一样,是利用特定dsDNA染料可以插入DNA双链小沟中(PCR产物)的特性,通过实时监测升温过程中dsDNA解链,荧光染料脱落,荧光信号减弱或消失的过程,高分辨记录熔解曲线,从而对样品进行检测。HRM技术利用dsDNA的物理性质,准确反映DNA序列碱基配对特异性与解链温度变化的情况,无需使用特异性标记探针,不受突变种类和突变位点的限制,具有高灵敏度和特异性、高通量、操作简单...
  • 培养细胞如何选择适合自己实验的血清?快点击进来看看吧!

    2016-09-02 培养细胞如何选择适合自己实验的血清?快点击进来看看吧!血清(Serum)即血液凝固析出的淡黄色透明液体将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆zui大的区别。在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应...
  • 细胞骨架的荧光探针标记方法

    2016-08-11 细胞骨架主要有微管(micmtuble,MT),微丝(microfilament,MF),中间丝(intermediatefilament,IF三种类型。它们分别由不同的蛋白单体组装而成,其中微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是细胞骨架的重要组成部分,也是zui常被研究的细胞骨架蛋白。1963年.Slauterback采用戊二醛常温固定方法.首先使用电镜在水螅刺细胞中发现了微管。随后,微丝和中间丝相继被发现。它们广泛存在于真核细...
  • 细胞培养支原体污染来源/检测/预防/去除

    2016-07-18 细胞培养支原体污染来源/检测/预防/去除一、细胞培养支原体污染来源及主要支原体种类支原体(Mycoplasma)是一种大小介于细菌和病毒之间(0.1-0.6μm),没有细胞壁、并独立生活原核生物,形态呈高度多形性,呈圆形、丝状或梨形。由于支原体直径较小,进行除菌过滤是,约1%的支原体可以直接穿过常规的0.22μm的微孔除菌滤膜,造成细胞的支原体污染。支原体污染的来源包括:(1)工作环境的污染,实验器材带来的污染;(2)操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群);(3)已受...
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