技术文章_第(6)页－和元李记（上海）生物技术有限公司

脂质过氧化传感器检测原理、使用方法与注意事项
2024-10-25 脂质过氧化是脂类的氧化降解过程，其主要由活性氧类（ROS）引发。脂质过氧化传感器（LipidPeroxidationSensor）是通过一种C11-BODIPY581/591试剂的氧化来检测活细胞中的脂质过氧化情况。C11BODIPY581/591本质上是一种亲脂荧光染料，具有良好的光稳定性、低荧光伪影特质，能积累在膜内。一旦染料的多不饱和丁间二烯基被氧化，荧光最大发射波长峰值从约∼590nm偏移至约∼510nm，活细胞的荧光从红色变为绿色，但仍维持亲脂性，从而反映膜的脂质过...
PEI转染的原理与使用操作方法
2024-10-25 PEI转染是目前工业化、大规模瞬时转染表达重组蛋白或病毒载体领域使用广泛的基因载体和转染试剂。PEI是一种带有高电荷阳离子的多聚物，极易与带负电荷的DNA分子结合，形成复合物。在HEK293和CHO等细胞中，采用PEI转染法能够获得较高的转染效率，尤其适用于大规模的瞬时转染表达实验。相较于磷酸钙法，PEI转染试剂制备更加简便，适用于更多种类的细胞，并且具有更高的性价比。与脂质体等转染试剂相比，PEI转染对细胞的毒性较小。对于难以进行瞬时转染的细胞而言，利用PEI进行慢病毒包装...
ROS活性氧试剂盒原理、应用与操作指南
2024-10-25 ROS作为生物体内一类重要的信号分子，其水平的变化与多种生理和病理过程密切相关。因此，准确、高效地检测ROS水平对于科学研究具有重要意义。ROS活性氧试剂盒正是一种用于检测细胞内ROS水平的实验工具，下面将对其原理、应用及操作方法进行详细介绍。一、试剂盒原理ROS活性氧试剂盒的核心原理主要基于荧光探针法，其中常用的是利用二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)作为荧光探针。DCFH-DA本身无荧光且能自由穿过细胞膜，进入细胞后，被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不...
无血清培养基：提高细胞培养可控性的关键
2024-10-16 无血清培养基是一种在生物技术中广泛使用的细胞培养基，其特点是不包含动物血清成分。这种培养基通过优化营养成分、添加适量的生长因子和激素等手段，为细胞提供了一个更为纯净、稳定的生长环境。在细胞培养过程中，无血清培养基在提高可控性方面发挥着关键作用。一、无血清培养基的优势避免血清批次差异：动物血清的来源和质量往往存在较大的差异，这可能导致实验结果的不稳定。无血清培养基通过标准化、可控的成分配置，避免了血清批次差异对实验结果的影响，从而提高了实验的可靠性和重复性。提高细胞分化可控性：...
鬼笔环肽染色原理（Alexa Fluor 488 标记鬼笔环肽使用方法）
2024-10-15 鬼笔环肽是一种双环七肽毒素，它能选择性的与动植物体内的纤维状的肌动蛋白(F-actin)结合，这种特殊的选择性使之成为研究细胞内肌动蛋白微丝(F-actin)的有力工具。在光学显微镜下,荧光标记过的鬼笔环肽(phalloidin-dyeconjugate)可以清晰地显示出细胞内微丝的形态和分布，广泛被应用于生物医学的研究当中。鬼笔环肽染色原理荧光标记的鬼笔环肽在纳克水平就可与F-actin选择性的结合并且易溶于水，为检测组织切片，培养细胞和无细胞体系中的actin的定位和定量...
红细胞裂解液的原理说明与使用方法
2024-10-12 红细胞裂解液是一种去除红细胞简便易行的方法，即用裂解液裂解红细胞，它既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法，主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。原理说明利用细胞内外的离子浓度差异，形成渗透压差，外部的水分会扩散至细胞内，使红细胞膨胀，达到裂解的效果。使用方法1.裂解红细胞(1)向1份待裂解的新鲜全血中加入3倍体积的红细胞裂解液（如1mL新鲜全血加入3mL红细胞裂解液...
不同细胞的冻存液配制比例（冻存液配置注意事项）
2024-10-11 细胞冻存液是用于在低温环境下保存细胞的一种特殊溶液，其主要目的是保护细胞在冷冻和解冻过程中免受损伤。细胞冻存液通常包含渗透性和非渗透性保护剂，如二甲基亚砜（DMSO）和甘油，这些成分可以渗透到细胞内部，降低细胞内外的电解质浓度，防止细胞内水分外渗，从而减少冰晶的形成。细胞冻存液配置概述常用的细胞冻存液配比为培养基：血清：DMSO=7:2:1，适用于多数细胞系，能够保证细胞在冻存过程中有较高的存活率。需要长时间保存或者具有特别珍贵性的细胞系调整为血清：DMSO的比例=9:1，这...
支原体清除剂可以和双抗一起用吗
2024-10-11 不得与除青链霉素双抗外其它抗生素混用。李记生物QuickCell支原体清除剂（1000X），通过抑制支原体DNA回旋酶活性，进而有效抑制支原体DNA的复制，从遗传物质着手杀灭支原体，让细胞摆脱支原体污染的困扰，确保验结果的可信度。主要用于清除细胞、血清、培养基中的支原体，整个过程仅需3-5d即可；本产品能够清除大部分种类的支原体，而对细胞本身无毒。李记已验证上百种细胞，如：小鼠胚胎干细胞或iPS细胞、人胚胎干细胞或iPS细胞、HEK293、Hela、HepG2、HCT116、...

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