PAGE预混快速凝胶试剂盒

产品描述

PAGE预混快速凝胶试剂盒是在传统的PAGE凝胶试剂盒的基础上改良的一种新型蛋白电泳凝胶试剂盒，在不改变传统使用习惯和蛋白质分子的分离环境的基础上，只需加入改良型促凝剂就能实现一步法灌胶，灌制下层胶后直接注入上层胶，无需液封，省时并提高了电泳的速度（室温环境，加入改良型促凝剂，15min即可凝固），有利于获得更好的蛋白电泳实验结果。

配胶过程中无需额外添加TEMED，本产品制备的凝胶可用于非变性PAGE凝胶电泳。

订购信息

产品组分

u  下层胶为分离胶，上层胶为浓缩胶。

运输与保存

常温运输。组分A、B、C、D在4℃保存，组分E在-20℃避光保存，有效期18个月。【注】：组分E开盖后可置于4℃保存，有效期3个月。

使用方法（以下数值均为使用伯乐Mini-PROTEAN电泳槽数值）

1.试剂准备

(1)     下层胶混合液的准备：

按0.75/1.0/1.5 mm厚度的胶板，下层胶A液和B液分别取2.0/2.7/4.0 mL于同一容器中混匀。

对应加入40/60/80uL 的改良型促凝剂，混匀。

(2)     上层胶混合液的准备：

按0.75/1.0/1.5 mm厚度的胶板，上层胶A液和B液分别取0.5/0.75/1.0 mL于同一容器中混匀。

对应加入10/15/20uL 的改良型促凝剂，混匀。

【注】：加入改良型促凝剂后，需轻柔混匀，防止过多氧气混入胶溶液，抑制凝胶聚合。

2.灌胶操作

(1)      灌胶：将上一步准备好的下层胶混合液倒入凝胶模具中（凝胶液加至距梳齿约0.5cm即可）。无需等待，可立即将已经准备好的浓缩胶混合液从左至右轻软打入或倒入模具内，避免在一个位置大力度冲击进入。

(2)     插梳与聚合：将梳子插入凝胶内，静置15min，等待凝胶聚合。

【注】：凝胶凝固速度较快，建议灌注完下层胶后再配制上层胶，以免上层胶提前凝固。

3.电泳操作

(1)     待凝胶聚合后，组装电泳槽，加入电泳缓冲液，小心地拔出梳子，检查胶孔并整理梳齿。

(2)     根据实验需要加入蛋白样品和蛋白分子量标准。

(3)     调整电泳仪为恒压150V，约60min（或200V，约45min）完成蛋白电泳实验。

注意事项

1.      本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

2.      本产品与传统的SDS-PAGE有本质上的区别，请按产品说明书操作。

3.      凝固后的胶，上下层胶的分界线平整度略弱于传统配制方法，但不影响后续电泳效果。

4.      本产品制备出的凝胶上层胶对样品没有浓缩效应，与预制胶类似，但与传统PAGE胶相比，对蛋白条带分离效果更好，小分子量蛋白(比如10kDa)也可以清晰地分离开，且蛋白条带更窄更锐利。

5.      改良型促凝剂的使用量仅供参考，按实际需求调整。加入较多量的改良型促凝剂可加速凝胶，反之亦然。凝胶速度与温度有显著的正相关性。同等条件下，温度越高，凝胶速度越快，室温过高时建议适当减小改良型促凝剂的用量。

6.      不同浓度试剂盒各组份请勿混用，否则会影响制胶及电泳效果。

7.      在制胶之前，使胶溶液及缓冲液平衡到室温（室温放置几分钟），可有效避免凝胶中气泡的形成。

可制备凝胶数量

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