技术文章_第(28)页－和元李记（上海）生物技术有限公司

胎牛血清使用中的常见问题解答
2022-09-19 1、如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此，推荐在-20℃以下储存血清，并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时，请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。2、血清中包含絮状...
提高细胞转染效率的方法有哪些？
2022-09-15 转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。分为物理介导方法：电穿孔法、显微注射和基因枪；化学介导方法：如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术；生物介导方法：有较为原始的原生质体转染，和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术，是目前转染效率较高的方法，同时具有细胞毒性很低的优势。但是病毒转染方法的准备程序复杂，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及。其它物理和化...
介绍细胞冻存的主要步骤
2022-09-13 细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%．15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO)，可使溶液冰点降低，加之在缓慢冻结条件下，细胞内水分透...
原代细胞转染的实验操作要注意的事项
2022-09-06 原代细胞（primaryculturecell）是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。细胞转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转...
选择真核细胞转染试剂要考虑哪些因素
2022-08-30 转染是采用除病毒感染外的其他方法将核酸(DNA或RNA)人工导入细胞的过程。采用各种化学、生物学或物理方法导入外源性核酸会改变细胞的特性,从而实现细胞基因功能和蛋白质表达研究。转染后,导入的核酸可以瞬时性地存在于细胞内,只表达一段时间且不会复制,也可以稳定地整合至受体基因组内,随着宿主基因组的复制而复制,各种基因输送系统采用的术语与该领域的技术进展步调一致,并进一步区分不同的方法和细胞类型。转染技术作为一种分析工具，可将外源基因导入真核细胞，有助于机体表征遗传、蛋白质合成、细...
影响细胞转染效率的因素有哪些？
2022-08-19 细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。影响细胞转染效率的因素有哪些？1.转染试剂的选择不同细胞系转染效率通常不同，但细胞系的选择通常是根据实验的需要，因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献，通过这些资料可选...
核酸纯化的方法及原理
2022-08-19 核酸抽提与纯化是分子生物学试验的基础，核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的最重要因素，也是下游分子生物学试验成败的关键。核酸纯化的方法及原理如下：一、PC抽提法PC抽提是去除蛋白质有效的手段，但超过了该饱和度，裂解体系中的蛋白质不会被一次去除，必须靠多次抽提，方可*去除。且每次抽提都会损失部分核酸。另外，体系太粘稠的坏处是，蛋白质难以*去除，以及基因组DNA会断裂得更厉害，所以要注意裂解液与样品的比例。PC抽提的另外一个用途是，利用酸性酚可以部分去除DNA的特点，在RNA抽提...
化学发光免疫分析包含免疫分析系统和化学发光分析系统
2022-07-22 在常温下由化学反应产生的光，产生电子能级处于激发态的物质，后者通过跃迁释放能量产生光子，从而导至的发光现象。化学发光是一个多步骤的过程。学发光免疫分析(ChemiluminescenceImmunoassay，CLIA)诞生于1977年，是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析，将高灵敏的化学发光技术与高特异性的免疫反应结合起来建立的微量测定技术，因此该技术灵敏度高、线性范围宽、应用范围广。而且CLIA与放射免疫分析(RIA)、荧光免疫分析(IFA)及酶免疫分析(...

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