技术文章_第(40)页－和元李记（上海）生物技术有限公司

如何正确的进行ELISA测定操作
2017-05-18 临床ELISA测定现通常为采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式，测定操作非常简单，一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面，其中任一步骤的不当都会影响测定结果，且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚。现分述如下。一、临床标本的收集和保存用于ELISA测定的临床标本zui为常用的是血清（浆），有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标...
PEI细胞转染液使用方法
2017-05-12 使用方法接种细胞：用胶原酶消化细胞并计数（不建议用胰酶）。转染前18-24小时进行细胞的铺板，以便在转染时，贴壁细胞的密度大约在80%左右。注：培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。2.准备EZTrans-DNA复合物（1）转染前将所有试剂置于室温10分钟。下面，以转染24孔板培养皿为例，说明转染的具体方法（如果在别的培养器皿中进行转染，各试剂建议使用量见表1.：（2）将1μg质粒DNA稀释到40μL无血清的高糖DMEM培养基，用移液枪吹吸3-4次。（3）将3μLEZTran...
ELISA试剂盒实验有哪些禁忌？
2017-04-25 ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研出产中zui为敏捷的技术手段。自己也为此苦恼过很长一段时间，跟着自己技术水平得进步，或多或少地也把握了ELISA体系的脾气，也是熟能生巧吧，现在做方阵，做ELISA已是轻车熟路了，以前检测一种抗体用整整一下战书还算得晕晕的，现在给我十个八个的从包被到显色，一个工作日基本搞定。ELISA试剂盒可是在新老手操纵过程中老是会泛起或大或小的题目，本人在刚开始做ELISA时就面对良多灾题，固然有师兄师姐铺路，但仍是经常做得乌烟瘴气，好比说花板...
特级胎牛血清说明书
2017-04-19 产品描述李记胎牛血清每一批原材料都经严格筛选，经过3次100nm(0.1μm)过滤，过滤材料符合美国FDA文件要求（21CFR211.72），整个生产过程符合胎牛血清生产、检测标准（EuropeanUnion(EU)Approved）。内毒素含量≤5EU/ml，100%不含病原性病毒（BVDV,IBRV,BPIV3），血红蛋白含量≤0.02%(w/v)，批次间质量稳定，适合于多种细胞培养，也可用于原代细胞、部分干细胞的培养。血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质...
cy染料小动物活体成像操作流程
2017-04-13 吲哚花菁绿(ICG，indocyaninegreen)是经过FDA认证的菁染料，出于安全考虑，后期应用于活体（人、动物、细胞）的染料在结构上都和ICG有相似或相近之处。cy系列染料是Amersham公司（目前为GE公司）zui初开发的染料体系，它的桥环由苯并吲哚变为吲哚环，并在吲哚的苯环上对称地引入硫酸根基团，水溶性得到很大改善，分子量降低后对大分子的亲和力有所增加。cy系列菁染料多带有羟基琥珀酰亚胺活性酯(NHSester)、异硫氰酸酯(NCS)等活性基团，可与蛋白质、多肽...
不接触染料也能进行DNA电泳的分析
2017-02-24 问：您是否为EB有毒，安全染料贵的问题而烦恼？答：试试李记生物的DNA电泳套装吧!图1：I、Hela细胞与EB,李记套装的上样buffer及李记GelRed在室温下孵育一小时，用Olympus荧光显微镜观察并拍照，与EB孵育的细胞显示出绿色荧光，表明染料已透过细胞膜进入细胞并与核酸结合。李记套装的上样buffer及李记GelRed未显示荧光，说明李记染料未能透过细胞膜进入细胞。II、EB,李记套装的上样buffer及李记GelRed染料相同DNA浓度下染色效果。李记生物的DN...
细胞冻存和复苏经验总结
2016-11-29 细胞冻存过程对保持细胞状态影响巨大，李记生物结合多年实践，总结出如下实用的细胞冻存流程。“慢冻快融”是细胞冻存及复苏的基本原则，这对zui大限度的保存细胞活力至关重要。目前细胞冻存多用甘油或二甲基亚砜（DMSO）作为保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性；细胞冻存和复苏时，减少细胞内冰晶产生是关键。缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少冰晶对细胞的物理损伤。复苏细胞采用快速融化的方法可以保证细胞外结晶在很短的时间内融化，避免由于缓慢融化使水分渗...
高分辨率熔解曲线（HRM）分析指南
2016-10-10 HRM(HighResolutionMeltinganalysis，高分辨熔解曲线)同许多荧光PCR技术一样，是利用特定dsDNA染料可以插入DNA双链小沟中（PCR产物）的特性，通过实时监测升温过程中dsDNA解链，荧光染料脱落，荧光信号减弱或消失的过程，高分辨记录熔解曲线，从而对样品进行检测。HRM技术利用dsDNA的物理性质，准确反映DNA序列碱基配对特异性与解链温度变化的情况，无需使用特异性标记探针，不受突变种类和突变位点的限制，具有高灵敏度和特异性、高通量、操作简单...

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