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DNA定量试剂盒的检测规程

更新时间:2017-07-04      点击次数:1105
  DNA定量试剂盒结果判断,如果Ct值=40,则实验样品的UU DNA含量(基因拷贝数/ml)<1×103。如果Ct值<40,则实验样品的UU DNA含量(基因拷贝数/ml)= M。检测样本中核酸阳性时,按实际结果报告;对可疑结果应复查,需要时与临床。注意事项,各标本沸水浴时间误差不超过1分钟。加样时每加完一个要立即盖上封闭好离心管。
 
  DNA定量试剂盒操作时,须戴手套。使用新鲜配制的 染色工作液,务必不要超过 2 小时,且注意避光。建议使用塑料管配制 染色工作液,而不是玻璃制品。孵育时,避免光照。系统检测,标准曲线测定 1 次即可;如果仪器更换,则需要重新测定 1 次。如果荧光读数过高,可以相应稀释样品量。可以使用荧光酶标仪检测,试剂用量和体系均除以 5,包括标准 DNA 含量,其计算公式[根据标准曲线获得样品对应DNA  浓度(微克)X样品稀释倍数]÷0.1(样品容量;毫升)=微克/毫升。盐类、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白、琼脂糖、单链 DNA 和 RNA 不会干扰检测。
 
  DNA定量试剂盒关闭扩增仪盖,按仪器操作规程开始循环。扩增结束后关闭扩增仪电源,取出PCR反应管,密封放入垃圾桶。产物分析,条件设置:反应结束后自动保存检测数据文件,调整荧光数值为F1/F2。点击Quantification读取结果。基线的确定:取3~8个循环的荧光信号。
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