线粒体染色试剂盒的作用说明

 

  线粒体染色试剂盒是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm 的理想荧光探针，JC-1染料表现出电势依赖性的积聚在线粒体内。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物，聚合物发出强烈的红色荧光Ex=585 nm, Em=590 nm不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失，JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中，产生绿色荧光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。因此颜色的变化非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。线粒体的去极化程度也可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。

 

  线粒体染色试剂盒的破坏是细胞凋亡早期发生的一个标志性事件。细胞受到凋亡诱导后线粒体膜电位的变化使得膜的通透性发生改变。膜通透性的增加，使得线粒体蛋白包括细胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸内切酶G（EndoG）、凋亡诱导因子（AIF）等从线粒体基质释放到细胞浆。细胞色素C的释放伴随膜电位的*丧失，进而引发细胞凋亡酶的级联效应.本试剂盒提供了CCCP 作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照.对于六孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100 个样品；对于12 孔中的样品，本试剂盒共可以检测200 个样品.这种特殊的试剂盒被设计为大的斯托克斯位移在Ex/Em = 405/550 nm处标记活细胞线粒体，使之带橙色荧光；试剂盒使用专有的染料，选择性地积聚在不同膜电位的线粒体中.是一种疏水性复合物，可以容易地渗透到完整的活细胞中，在进入细胞后就被锁定在线粒体中。这种荧光性线粒体指示剂可以在线粒体中保留很长时间，因为该指示剂带有能定位于细胞的基团。这个关键的功能，显著的提高了其染色效率。试剂盒中使用的线粒体染色非常耐光，使得荧光相当强劲。它可以很容易地适应各种各样的荧光平台，如微孔板检测、免疫细胞化学和流式细胞仪；以及各种各样有用的的研究，包括细胞粘附、趋化性、多药耐药、细胞活力、细胞凋亡和细胞毒性。