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线粒体染色试剂盒可做的事情还蛮多的

更新时间:2018-07-10      点击次数:1104
  线粒体染色试剂盒可以标记活细胞中的线粒体,使之带红色荧光(Ex/Em =575/600nm)(Texas Red filter) 本试剂盒使用染料为一种疏水性复合物,属线粒体选择性染料,该染料能轻易进入活细胞内,通过线粒体膜电位变化渗透进入线粒体,并在线粒体中富集。Smart Cell线粒体染色试剂盒提供了标记线粒体的全套试剂,能提供蓝色/绿色/红色/橙色等不同荧光供选择,既可单独使用,也支持对细胞的多重荧光分析。这种的细胞标签为从空间上和时间上研究发生的细胞活动提供了一种十分有效的方法。
 
  线粒体染色试剂盒检测原理,L-谷氨酰胺是人体蛋白质所必需的20种氨基酸之一。是人体内zui普遍的、不可缺乏的条件性必需氨基酸,是构成蛋白质*的氨基酸之一,更是某些细胞培养中zui基本的元素。由于谷氨酰胺不稳定的特性,在细胞培养基的整合中,易自发性分解为谷氨酸和氨离子,而氨离子对细胞的毒性很强,因此,在细胞培养体系中,须密切关注谷氨酰胺的储存寿命(SHELF LIFE)和实时监测。在谷氨酰胺酶和谷氨酸脱氢酶的双酶循环反应系统中,L-谷氨酰胺首先发生脱氨基反应,产生谷氨酸和氨离子。
 
  线粒体染色试剂盒细胞染色,贴壁细胞,在96孔板(100μL)或培养皿内培养细胞,当细胞达到70-80%融合度,在96孔板或培养皿内添加等体积的染色工作液(步骤1.2),在37°C, 5% CO2条件下培养细胞30分钟-2小时。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks缓冲液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 与生长培养基按1:1)替换色染液。同TRITC设置在显微镜下进行荧光观察。注意:如果细胞没有充分染色,可以适当增加染料浓度或增加染色时间进行改善。悬浮细胞: 在1000 rpm 条件下离心细胞培养液5分钟,弃去上清,用预热好的细胞培养液温和的重悬细胞,然后添加等体积的染色工作液(步骤1.2)在37°C, 5% CO2条件下培养细胞30分钟-2小时。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks缓冲液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 与生长培养基按1:1)替换色染液。同TexasRed设置在显微镜下进行荧光观察。
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