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使用CCK-8要注意的事项有哪些

更新时间:2021-10-25      点击次数:1541
  CellCountingKit-8(简称CCK8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。相信做细胞的同学对他都很熟悉,你确定你使用CCK-8试剂的方式是*正确的吗?
使用CCK-8要注意的事项有哪些:
  1.酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰,可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。
  2.CCK8可以检测大肠杆菌,但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染,以免影响结果。
  3.当在培养箱内培养时,培养板最外一圈的孔最容易干燥挥发,由于体积不准确而增加误差。一般情况下,最外一圈的孔只加培养基,不作为测定孔用。
  4.在培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时,还应考虑药物的吸收,可在加入药物的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450nm的吸光度作为空白对照。
  5.金属对CCK8显色有影响:当终浓度为1mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5%、15%、90%的显色反应,使灵敏度降级。如果终浓度是10mM的话,将会100%抑制。
  6.悬浮细胞由于染色比较困难,一般需要增加细胞数量和延长培养时间。
  
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