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PEI转染试剂是非常有潜力的非病毒质粒载体试剂

更新时间:2022-03-28      点击次数:1877
     分子生物学的发展使得大量致病基因被鉴定,科学家在这些研究成果的基础上发展了基因治疗。基因治疗是利用基因载体将治疗基因导入患者体内,进而表达功能蛋白以达到治疗的目的。基因治疗传递DNA面临的挑战之一是外源治疗基因会被体液和胞外空间的核酸内切酶降解。治疗基因在目标组织中的选择性积累、细胞内化以及从溶酶体逃逸这些问题对所有核酸治疗剂都是需要克服的。DNA必须输送至细胞核以允许获得转录和表达。因此,设计和制备安全高效的基因载体来压缩并且保护治疗基因以免被核酸内切酶降解并延长其在体内的循环时间显得尤为重要。目前,基因载体主要分为两大类:病毒载体和非病毒载体。
  最初受到重视的基因载体是病毒,因为其具有较高的转染效率。理论上,病毒载体转染效率为100%。
  阳离子聚合物-聚乙烯亚胺(PEI)是目前报道的工业化、大规模瞬时转染表达重组蛋白领域*泛使用的基因载体和转染试剂。人胚胎肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞是目前工业大规模瞬时转染领域使用广泛的宿主细胞。PEI是基因载体中最常见的阳离子聚合物之一,因为其具有高的转染效率,所以作为基因转染的黄金标准而常被用来参照。PEI形成复合物的最佳分子量通常在5~25kDa之间。高分子量PEI一般比低分子量PEI有更高转染效率,但问题在于,高分子量的PEI往往有较高的细胞毒性,这一规律与其他聚阳离子类似。
  目前使用广泛的阳离子聚合物转染试剂是PEI。PEI制备简单,价格便宜,有线状和枝状两种商业试剂可选,是瞬时转染放大转染试剂的较好选择,是非常有潜力的非病毒质粒载体试剂。
  由于PEI带正电荷,与带负电荷的DNA结合形成带正电荷的PEI-DNA复合物,可以与带负电荷的细胞表面结合。PEI-DNA复合物通过胞吞作用进入细胞内部形成内涵体,之后一部分从内涵体中逃逸进入细胞核内,未逃逸的进入溶酶体被降解,无法入核的DNA会在100min内被胞浆中的DNA酶降解。
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