黑胶虫是一种生物还是非生物,学术界至今还有争议,这里暂且将其认作是一种微生物。黑胶虫往往来源于血清,是一种常见的细胞污染物,与细胞共生,随细胞传代而传代,通常抗生素对其无效。黑胶虫与细胞竞争性生长,对细胞生长不利,严重时导致细胞死亡。目前很多细胞存在被黑胶虫污染的现象,对细胞培养及其后续实验造成了极大地影响。
黑胶虫特征
• 培养基和正常培养基没有区别;
• 低倍镜下是黑色的点点和细胞碎片没有区别;
• 高倍镜下可以观察到点状片状的游动小体,能模仿细胞碎片和细胞分泌物做布朗运动;
• 与细胞的数量成反比,细胞越多,它越少,细胞越少它越多,更换培养液或洗涤细胞不能将其去除;
• 细胞生长缓慢,同时营养消耗快,需频繁更换培养液,细胞状态越养越差。
解决方法
• 若细胞状态尚可,最为快速有效的处理方式就是采用黑胶虫清除剂对黑胶虫进行清除,同时确保培养体系中的血清必须为无黑胶虫和原虫污染的优质血清,然后增加细胞密度,继续培养2-3代可清除;
• 若细胞状态很差,建议消杀后丢弃。
• 黑胶虫污染的细胞培养液不浑浊,颜色、透明度无明显变化,细胞增殖旺盛后会自然消失,更换血清外无需特殊处理可以增加细胞的种板密度以提高细胞的生存率,对于黑胶虫的污染目前只能采用高品质的血清进行预防。
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