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说说溶酶体染色试剂盒的特点概述

更新时间:2018-05-22      点击次数:1080
  溶酶体染色试剂盒是设计用来标记活细胞的线粒体的,使之带上不同颜色的荧光。本试剂盒使用一种专属染料,选择性地在溶酶体中积累。这种LysoBrite溶酶体指示剂是一种疏水性复合物,可以轻易地渗透进入活细胞中,且当进入细胞后就被锁定在线粒体中。这种荧光性溶酶体指示剂可以在线粒体中保留很长时间,因为该指示剂带有能定位于细胞的基团。其关键特征是其染色效率显著性提高。 Cell Navigator溶酶体染色试剂盒标记方法十分稳定,需要亲手操作的地方很少。它可以用于许多荧光研究中,例如微孔板分析,免疫组化和流式细胞术。它也可以用于多种不同类型的研究中,包括细胞粘附性、趋化性、多药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性的研究。
 
  溶酶体染色试剂盒细胞化学染色法,SA-βgal在pH6.0时,可将 5-溴-4-氯-3-吲哚基 β-D-吡喃半乳糖苷(5-bromo-4-chloro-3-indoyl β-D-galactopyranoside ,X-gal)水解,产生不溶于水的蓝色物质。这种蓝色产物相当稳定,固定干燥后避光可保存几个月。通过计算总群体中蓝色细胞的数量,可以很容易地确定SA-β-半乳糖苷酶阳性的细胞比例,即衰老细胞的比例。但是需要注意的是,在所有细胞中普遍存在酸性半乳糖苷酶(acidic β-galactosidase),在pH4.0时发挥作用。其实SA-βgal发挥作用的zui适pH为4.5,但是在pH4.5时,酸性半乳糖苷酶也会水解底物,因此需要使用SA-βgal次适pH6.0,才能确保蓝色产物是由于SA-βgal的作用而产生的。通常我们使用pH为6.0的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。
 
  溶酶体染色试剂盒目前针对溶酶体的定位也主要围绕酸性磷酸酶展开。经典的溶酶体荧光染色试剂盒(蓝/绿/橙/红色)— 超越LysoTracker!LysoTracker系列溶酶体荧光染料被广泛应用。然后由于其细胞毒性,LysoTracker在染色几个小时后便失去检测效应,更不能随细胞传代而持续示踪染色。另外,LysoTracker的较容易淬灭的光学不稳定性也经常被一些研究者所诟病。 在此,艾美捷特向您推荐由LysoBrite新一代溶酶体专属荧光染料组成的系列溶酶体荧光染色试剂盒产品。作为新一代荧光染色,LysoBrite具有更低细胞毒性、更亮的荧光强度,和更高的荧光耐淬灭性。
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