溶酶体染色试剂盒的重要理论

更新时间：2018-08-09

点击次数：1548

溶酶体染色试剂盒通常匀化次数为20至40下（或细胞颗粒群/组织块状消失为止）达到80％的细胞裂解为理想状态，但不同的组织或细胞类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的细胞裂解程度，完整细胞呈现发亮的圆环，低于50％可以增加匀化次数。通常孵育5分钟（不宜超过5分钟）达到80％的细胞裂解为理想状态，但不同的组织或细胞类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升裂解物的细胞裂解程度，完整细胞呈现发亮的圆环。低于50％可以增加孵育时间和涡旋震荡次数。

溶酶体染色试剂盒可将胞内废物、脂质、碳水化合物、蛋白质及其他大分子等物质分解为小分子化合物。正常的溶酶体功能使细胞能有效的动员和循环利用细胞组分，但也能阻止受损细胞器、错误折叠蛋白质及入侵病原物的积累。虽然溶酶体存在于所有动物细胞中，但在抗病细胞如淋巴细胞中丰度高。溶酶体含有约50种不同的降解酶，所有水解酶在pH5左右活性，但其周围胞质中pH为7.2。溶酶体膜内含有一种特殊的转运蛋白，可以利用ATP水解的能量将胞质中的H+泵入溶酶体，以维持其pH5。这些酶协同作用，以维持蛋白和细胞器的稳态。若溶酶体内的这些酶发生异常则会导致多种疾病的产生，这些酶如组织蛋白酶D的表达水平显著降低。上调表达溶酶体基因的水平，正探索作为治疗神经退行性疾病如帕金森症的一种潜在的治疗途径。

统计学分析所得计量数据采用均数±标准差(X±S)表示采用SPSS17.0进行统计分析，两样本均数的比较采用独立样本t检验,p<0.05为具有统计学差异。每组实验结果重复3次。结果2.1 Lysotracker Red染色观察CREG对小鼠腹腔巨噬细胞溶酶体发生数量的影响不同实验组小鼠腹腔巨噬细胞Lysotracker Red染色结果显示，与C57小鼠相比，CREG+/-杂合子小鼠腹腔巨噬细胞中lysotracker红色荧光强度明显减少。而与CREG+/-杂合子小鼠相比，微量渗透泵以30μg/kg/d皮下给予重组CREG蛋白的CREG+/-杂合子小鼠腹腔巨噬细胞lysotracker红色荧光强度明显增加。