线粒体染色试剂盒的相关知识普及

    以细胞质染色呈棕黄色或黄色为阳性，染色结果采用Image-pro6.0图像分析软件进行分析，高倍镜(×400)下每张切片随机选择5个视野，测定吸光度值(A值)并取其平均值作为该切片的A值。Omi/HtrA2的胞内转位间接免疫荧光双染色法，在激光共聚集显微镜下观察。取制备好的10μm厚的冷冻切片，采用免疫组织化学法，严格按免疫组织化学试剂盒和线粒体染色试剂盒说明书操作。线粒体的染色为绿色荧光,Omi/HtrA2的染色为红色荧光,分别用绿色及红色通道扫描，后合成。以胞质中线粒体绿色荧光与Omi/HtrA2红色荧光重叠合成黄色为阴性细胞,代表Omi/HtrA2尚未发生胞内转位。反之，胞质中红色荧光与绿色荧光未发生重叠而相互分离为阳性细胞,代表Omi/HtrA2已经发生胞内转位,随机取多个视野计数共200个细胞中的阳性细胞,以其比例做统计分析。统计学处理采用SPSS 17.0软件对其行单因素方差分析,结果用x珋±s表示,组间比较采用LSD法,P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1肺组织形态结构变化对照组早产鼠1 d、3 d、7 d肺组织未见病理改变,肺泡结构逐渐发育成熟。高氧组早产鼠高氧暴露1 d时,与对照组比较差异无统计学意义，高氧暴露3 d时,逐渐出现肺泡壁毛细血管充血扩张,肺泡腔及间质内有少量炎性渗出，高氧暴露7d时，肺损伤较严重，肺泡腔和间质内大量炎性细胞浸润，肺泡间隔增厚，肺泡数目减少，且结构简单化和囊泡化，间质内胶原样物质增生，部分肺组织可见肺泡萎缩和肺不张。与高氧组相比，二氮嗪组肺组织受损得到改善。