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线粒体染色试剂盒的应用细节

更新时间:2017-10-23      点击次数:830
  线粒体染色试剂盒其主要功能是提供细胞 内各种物质代谢所需要的能量。在光学显微镜下线粒体呈现为颗粒状、棒状或弯曲细线。线粒体荧光探针 MitoTracker RED 硫醇 Thiol ,是一种含有 ( )氯甲基基团的荧光染料,自由通过细胞膜,选择性地聚集 在线粒体。它可以对活细胞进行直接染色,在 580nm 波长可以清晰看到被染成红色的线状或颗粒小体的线粒体。并可以分析线粒体膜电位,以检测线粒体活性。 产品内容 清理液(Reagent A ) 毫升 固着液(Reagent B ) 毫升 预备液(Reagent C ) 毫升 染色液(Reagent D ) 微升 产品说明书 1 份 保存方式 保存 染色液(Reagent D )在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月用户自备。 
 
  线粒体染色试剂盒用于沉淀真菌/酵母细胞 培养箱:用于染色孵育 (共聚焦)荧光显微镜:用于细胞荧光分析 1 实验步骤 实验开始前,将-20 ℃冰箱里的试剂盒中的染色液(Reagent D)置入冰槽里融化,然后分别移 出xx 微升预备液(Reagent C )和 xx 微升染色液(Reagent D )到新的 1.5 毫升离 心管,标记为染色工作液,并放在暗室里备用。然后进行下列操作。 一、 活体染色 7 1. 准备好 1 毫升新鲜的酵母菌液(OD600 =1 至 2 ;1 X 10 细胞/毫升) 2 . 移入到 1.5 毫升离心管 3 . 放进微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 1000g (或3000RPM,例如 eppendorf 5415 ) 4 . 小心抽掉上清液 5 . 加入 xx 毫升预冷的 清理液(Reagent A ),混匀 6 . 放进微型台式离心机离心 10 分钟,速度为 1000g (或3000RPM,例如 eppendorf 5415 ) 7 . 小心抽掉上清液 8. 重复实验步骤 5 至 7 一次 9 . 加入 xx 升预冷的 清理液(Reagent A ),混匀 10.加入xx 微升含有 预备液(Reagent C )和染色液(Reagent D )的染 色工作液,充分混匀
 
  线粒体染色试剂盒是设计用来标记活细胞的线粒体的,使之带绿色荧光。本试剂盒使用一种专属染料,选择性地在不同膜电位的线粒体中积累。这种线粒体指示剂是一种疏水性复合物,可以轻易地渗透进入活细胞中,且当进入细胞后就被锁定在线粒体中。这种荧光性线粒体指示剂可以在线粒体中保留很长时间,因为该指示剂带有能定位于细胞的基团。其关键特征是其染色效率显著性提高。本标记方法十分稳定,需要亲手操作的地方很少。它可以用于许多荧光研究中,例如微孔板分析,免疫组化和流式细胞术。它也可以用于多种不同类型的研究中,包括细胞粘附性、趋化性、多药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性的研究。本试剂盒提供所有的必需组分和*细胞标记方法。它适用于增殖型和非增殖型细胞,也可以用于悬浮和贴壁细胞。
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