总RNA提取试剂盒（trizol）

产品描述
    TRIzol的主要成分是异硫 qíng 酸胍，它可以破坏细胞，使细胞RNA释放出来，同时保护RNA的完整性，因此，常用于动植物细胞RNA的提取。
订购信息

运输与保存
常温运输。4℃避光保存，有效期12个月。
使用方法
1.准备样品
（1）组织样品
液氮研磨组织法，组织块直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次后，按组织样品质量与 T R I z o l 体积按照50~100mg/mL加入，匀浆。
【注】：组织体积不能超过 T R I z o l 体积的10%， 否则匀浆效果不好，用电动匀浆器匀浆约需1~2 min 。
（2）细胞
对于培养贴壁细胞:不须消化，可直接用 T R I z o l 进行消化及裂解， T R I z o l 体积按10cm²/mL比例加入。
对于悬浮细胞可直接收集，消化裂解，每1 mL T R I z o l 可裂解 5×10⁶动物、植物或酵母细胞，或1×10⁷细菌细胞。

2. 细胞或组织加 T R I z o l 后，室温放置5 min,使其充分裂解。

【注】：此时可放入﹣70℃长期保持。

3. 12,000g离心5 min,弃沉淀。

4. 按200 μL氯仿/ml T R I z o l 加入氯仿，振荡混匀后室温放置15 min。

【注】：禁用漩涡振荡器，以免基因组DNA断裂。
5. 4℃,12,000g离心15 min 。

6. 吸取上层水相，至另一离心管中。

【注】：千万不要吸取中间界面:若同时提取DNA和蛋白质，则保留下层酚相存于4℃冰箱，若只提RNA,则弃下层酚相。
7. 0.5ml异丙醇/mI T R I z o l 加入异丙醇混匀，室温放置5~10 min 。
8. 4℃ 12,000g离心10 min, 弃上清，RNA沉于管底。

9. 按1 mL 75%乙醇/ml T R I z o l 加入75%乙醇，温和振荡离心管，悬浮沉淀。

10. 4℃ 8,000g 离心5 min, 尽量弃上清液。

11. 室温晾干或真空干燥5~10 min。

【注】：RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。
12. 可用50 μL H2O、TE buffer或0.5%SDS溶解RNA样品，55~60℃ ,5~10 min。
【注】：H2O.TE或0.5%SDS均须用DEPC处理并高压。
注意事项
1.操作人员应经过专门培训，严格遵守操作规程。
2.操作处置应在具备局部通风或全面通风换气设施的场所进行。
3.避免眼和皮肤的接触，避免吸入蒸汽。
4.远离火种、热源，工作场所严禁吸烟。
5.整个提RNA过程需要无RNase的实验用具。
6.本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。
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