详细介绍
品牌 | Life-iLab/李记生物 | 货号 | AN19L050、AN19L051 |
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供货周期 | 现货 | 应用领域 | 生物产业 |
产品描述
李记生物的细胞/病毒裂解试剂盒(10×Lysis Buffer)是一种比较强烈的细胞/病毒裂解液,主要成分为Tris-HCl、SDS以及Tween-20、EDTA等。裂解液裂解得到的核酸样品可以用于常规的PCR、qPCR、ddPCR等。
本产品可以用于细胞/病毒样品。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
10×细胞/病毒裂解试剂盒(10×Lysis buffer) | AN19L050 | 1mL |
10×细胞/病毒裂解试剂盒(10×Lysis buffer) | AN19L051 | 2*1mL |
产品组分
组分 | AN19L050 | AN19L051 | 储存条件 |
A. 10×裂解液 | 1 mL | 2*1 mL | -20℃ |
B. Proteinase K | 20 mg/mL | 20 mg/mL | 4℃或室温 |
运输与保存
蓝冰运输。组分A在-20℃保存,组分B在4℃或室温保存,有效期12个月。
使用方法
1. 从冰箱中取出10×裂解液,置于室温条件下溶解,涡旋混匀后待用。
2. 10×裂解混合液配制:裂解试剂的单位使用量见下表,可按实际用量的1.1倍配制混合液,根据实际样本量(N),取相应体积的10×裂解液和Proteinase K(Proteinase K在使用前加入),涡旋振荡混匀后使用。Proteinase K用量可根据实验需要适当调整。
单位用量 | 实际用量(1.1×N) | |
10× Lysis Buffer(10*) | 1.8 | 1.98N |
Proteinase K | 0.2 | 0.22N |
3. 操作步骤
3.1 病毒样本
取病毒溶液18μl和10×裂解液(含Proteinase K)混合液2μl,建议裂解条件如下,实际裂解条件可根据裂解体积作相应调整。
温度 | 时间 | |
消化 | 68℃ | 15min |
灭活 | 98℃ | 3min |
3.2 细胞样本
3.2.1 1×裂解液(含Proteinase K)配制
实验前根据实际需要,使用PDB(和元生物货号:RP004)或PBS,将步骤2配制好的10×裂解混合液,稀释至1×裂解混合液。
3.2.2 样本前处理
①贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍,胰mei消化后离心收集细胞。
②悬浮细胞:400g离心5min收集细胞,轻轻涡旋振荡或者弹击管底以把细胞尽量分散开。
3.2.3 样本裂解
按照<1E7细胞量每孔加入100 μl的1×裂解液,涡旋振荡15s充分裂解细胞,充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成<1E7细胞/管,然后再进行裂解。建议裂解条件如下,实际裂解条件可根据裂解体积作适当调整。
温度 | 时间 | |
消化 | 55℃ | 60min |
灭活 | 95℃ | 15min |
4. 样品充分裂解后稀释10倍,可直接用于下游的PCR扩增。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 为取得最佳的使用效果,尽量避免反复冻融,建议分装后使用。
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本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
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