DAPI染液

产品描述

DAPI是一种常用于细胞核染色的蓝色荧光染料，优先结合双链DNA，尤其是与小沟中的AT区域结合。此外，DAPI亦可结合RNA，但结合模式不同。与DNA复合物相比，DAPI/RNA复合物的荧光发射波长较长（约500 nm），而DAPI/DNA复合物的发射波长为约460 nm。

在多色荧光染色技术中，DAPI作为常用的核染色剂，因其蓝色荧光能够与绿色、黄色或红色荧光形成鲜明对比。DAPI具有较高的细胞核特异性，几乎不染色细胞质。本染液浓度为3 μM，非无菌制剂。

订购信息

运输与保存

蓝冰运输。-20℃避光保存，有效期 12个月。

使用方法

1.     贴壁细胞的复染

1.1  样品准备

1.1.1      使用适当的固定剂固定贴壁细胞样品，确保细胞形态保持完整。固定后，使用DAPI染料进行细胞核核染色。

1.2  复染流程

1.2.1      用PBS短暂平衡样品；

1.2.2      加入适量的DAPI染液，确保覆盖细胞，孵育3-5min；

1.2.3      用PBS漂洗样品数次，轻轻吸去多余液体，避免细胞干燥；

1.2.4      在配有合适滤片的荧光显微镜下观察样品。

2.     悬浮细胞的复染

2.1  样品准备

2.2.1 收集悬浮细胞2×105~1×106个细胞，通过离心收集沉淀，弃去上清；

2.2.2 轻弹试管，使沉淀在剩余的液体中重悬，在加入1mL PBS；

2.2.3 将细胞悬液缓慢的加入4mL乙醇中，同时以最大的速度涡旋。将含有细胞的乙醇在-20°C放置5-15min；

2.2.4 通过离心，使细胞沉淀，弃上清；

2.2.5 轻弹试管，使沉淀松散，在加入5ml PBS。

2.2  复染流程

2.2.1 离心使细胞沉淀，弃上清，轻弹试管，使沉淀松散，加入2~3mL DAPI染液；

2.2.2 室温下孵育15min；

2.2.3如果使用荧光显微镜观察细胞，将样品离心后，弃上清，用新鲜的缓冲液重悬沉淀。在显微镜载片上滴加一滴细胞悬液，加盖片后观察。

注意事项

1． 本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

2． 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3． 使用观察蓝色荧光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。

4． 自备PBS，固定液及抗荧光淬灭封片液。

5． 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。

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