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品牌 | Life-iLab/李记生物 | 货号 | AC25L166 |
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规格 | 100T | 供货周期 | 现货 |
应用领域 | 生物产业 |
产品描述
本试剂盒包含创新性的 Exosome Tracker,一种专用于外泌体荧光标记的示踪染料探针。Exosome Tracker 的标记效率高于其他探针,采用共价方式嵌入胞外囊泡的双层膜结构,优于亲脂或疏水性染料,避免自组装纳米粒子引起的信号干扰,从而提升标记效率。Exosome Tracker可简单有效的进行体外外泌体的跟踪和监测,因其具有较长的体内半衰期,标记后的外泌体可用于动物体内示踪实验。其激发光波长为 580 nm,发射光波长为 664 nm。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
外泌体示踪试剂盒 | AC25L166 | 100T |
产品组分
组分 | 规格 |
A. Exosome Tracker | 100μL |
B. Exosome Tracker Remover | 1mL |
运输与保存
蓝冰运输。-20℃避光保存,有效期12个月。
使用方法
自备试剂与耗材:DAPI、PBS(新鲜配制,无菌)、共聚焦专用平皿、缓冲液置换试剂盒或其他缓冲液置换产品。
1. 试剂准备
Exosome Tracker 使用前需从 -20℃ 取出,避光解冻备用。注:Exosome Tracker 为 200×浓度,收到后建议分装避光保存于 -20℃。
2. 标记
(1) 标记外泌体:按 1:200 (v/v) 比例将 Exosome Tracker添加到外泌体溶液中,37℃避光孵育1 h,轻轻上下颠倒以确保染色均匀。
(2) 去除游离Exosome Tracker:加入 0.1倍体积的 Exosome Tracker Remover,室温避光孵育10 min以中和多余探针,再用缓冲液置换试剂盒将溶液置换为 PBS,以去除游离的 Exosome Tracker,获得纯净的荧光标记外泌体。注:根据样本体积选择合适的缓冲液置换产品:S-缓冲液置换试剂盒 (货号: AC25L491) 适用于100-180 μL;M-缓冲液置换试剂盒 (货号: AC25L492) 适用于 0.2-0.5 mL;L-缓冲液置换试剂盒 (货号: AC25L493) 适用于1-2.5 mL。
3. 示踪
对于细胞实验
(1) 接种细胞:按合适的密度将细胞接种在共聚焦专用平皿中培养。
(2) 孵育外泌体:当细胞生长至70%时,加入荧光标记的外泌体,在细胞培养条件下避光孵育。注:根据细胞类型和外泌体来源确定具体孵育时间,通常为2h,可调整范围为2-4h。
(3) 清洗与染色:取出平皿,用 PBS 清洗3次,加入DAPI溶液,室温避光孵育10min,再用PBS清洗3次。若直接检测可跳过固定步骤,否则用4%多聚甲醛固定细胞。
(4) 荧光检测:在激光共聚焦显微镜下观察细胞和外泌体,拍照记录。
对于动物实验
(1) 实验动物准备:例如选择 6-8 周龄小鼠或其他适龄动物模型,每周给予两次一定剂量的外泌体。
(2) 外泌体给药:根据预设的外泌体剂量、给药方式和频次,将 Exosome Tracker 标记的外泌体注入动物体内。
(3) 检测:外泌体给药后,通常在 6-8 周后进行活体发光成像或其他荧光检测。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,操作过程中请注意避光,以减缓荧光淬灭
4. 本品需要根据细胞类型,培养条件以及应用方向来摸索最佳的工作浓度及染色时间。
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