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技术文章
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液体培养基接种要注意的事项有哪些
2021-02-24
液体培养基,固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。它具有进行通气培养、振荡培养的优点。在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。由于在通气或在振荡的条件下,可消除这种阻碍以及增加供氧量,所以有利于细胞生长,提高生产量。液体培养基接种要注意的事项有哪些:①用酒精棉消毒操作台面。将移液器吸头盒放入酒精灯右侧,靠近酒精灯放置。将需要进行液体转接的试管插在试管架上,置于酒精灯左边左手附近。将移液器调至合适的刻度放于右手附近的架子上...
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影响细胞培养的环境因素有哪些
2021-02-22
细胞培养(cellculture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个*的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术*的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。细胞培养技术是细胞生...
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选用牛血清白蛋白BSA需要考虑哪些问题
2020-12-12
牛血清中的简单蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白蛋白BSA,又称第五组分...
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关于牛血清白蛋白BSA的知识你了解多少
2020-12-10
牛血清白蛋白BSA,又称第五组分,是牛血清中的一种球蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430kDa,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在westernblot中作为Blockingagent。它是牛血清中的简单蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自...
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哪些因素影响了高保真DNA聚合酶的保真度?
2020-10-22
高保真DNA聚合酶的保真度是指准确复制目的模板的结果。具体来说,这涉及到多个步骤,包括读取模板链,选择正确的三磷酸核苷,并将此核苷酸插入3’引物末端的能力。为了区分正确和错误的核苷酸,一些DNA聚合酶具有3’到5’核酸外切酶活性。这种“校正”活性可切除不正确掺入的单核苷酸,并将其替换成正确的核苷酸。高保真PCR使用掺入错误率低且具有校正活性的DNA聚合酶,以保证目的DNA的忠实复制。在设计PCR实验时,你首先要考虑你的应用是否需要高保真聚合酶。如果实验结果依赖于正确的DNA序...
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如何储存和解冻胎牛血清才不会使产品质量受损?
2020-08-24
胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。血清是细胞培养中用量大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。如何储存和解冻胎牛血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋...
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溶酶体染色试剂盒是一类荧光成像工具
2020-06-27
溶酶体染色试剂盒对于悬浮细胞,取10~60万细胞,重悬于0.5mL细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红加入0.5mLJC-1染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。在孵育期间,按照每1mLJC-1染色缓冲液(5×)加入4mL蒸馏水的比例,配制适量的JC-1染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。37℃孵育结束后,600g4℃离心3~4分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。溶酶体染色试剂盒是一类荧光成像工具,用来标记亚细胞,细胞器;例如细胞膜、溶酶体、...
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细胞培养中马血清的作用有哪些
2020-06-19
马血清采自健康马血液为原料,封闭系统内无菌采血,微孔过滤而成,性状为澄清液体,无噬菌体、超低内毒素,无溶血无异物无细菌真菌支原体霉形体衣原体等,促细胞生长繁殖效果佳,适用于细胞、组织器官培养、细胞株保藏、单抗研制,是医院、科研院校、动物疫苗、生物制药厂家重要培养基之一。细胞在单纯的培养基中不能存活,在特殊类型的细胞培养中必须提供某些营养物质和生长因子才能是细胞得以生长并维持生长状态。基础培养基常常要添加血清,血清终浓度多为5-20%。特殊用途的血清来源需用经验确定。广泛应用的...