技术文章_第(23)页－和元李记（上海）生物技术有限公司

蛋白酶K的配制标准及保存方法
2021-10-26 蛋白酶K广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面.一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般储存在-20°C,避光防潮密闭干燥。蛋白酶Ｋ主要应用于基因检测中基因抽取，是检测试剂盒生产的重要原料，蛋白酶K产品由于在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白质的能力，因而被广泛应用于制备脉冲电泳的染色体DNA，以及去除DNA和RNA中的核酸酶。现有基因抽提及检测试剂盒中均需配备该酶。蛋白酶K配制标准：20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinaseK)：将2...
使用CCK-8要注意的事项有哪些
2021-10-25 CellCountingKit-8（简称CCK8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。相信做细胞的同学对他都很熟悉，你确定你使用CCK-8试剂的方式是*正确的吗？使用CCK-8要注意的事项有哪些：1.酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰，可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。2.CCK8可以检测大肠杆菌，但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染，以免影响结果。3.当在培养箱内培养时，培养板最外一圈的孔最容易干燥挥发，由于体积不准确而增加误...
胎牛血清与新生牛血清在蛋白组成上的差异有哪些
2021-09-26 胎牛血清（FetalBovineSerum,FBS）是在屠宰怀孕母牛的时候，通过心脏穿刺采取胎牛血获取的血清，因其未与外界环境接触，所以血清内IgG等免疫因子相对含量较少，适合用于免疫类细胞的培养。胎牛血清与新生牛血清在蛋白组成上的差异还是很明显的。首先，胎牛血清总蛋白含量（g/dl）约为2%-4%,新生牛血清约为3.0%-5.0%,成牛血清则高达8%-10%.从蛋白含量上也可以初步判断一个血清是否为胎牛或新生牛血清，蛋白含量越高说明牛龄越大，目前检测蛋白含量是初步检测一项重...
常见的细胞转染技术可分为瞬时转染和稳定转染
2021-08-29 细胞转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮...
一文带你了解关于细胞增殖的知识
2021-08-27 一、什么是细胞增殖细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的细胞，用来补充体内衰老或死亡的细胞。二、细胞增殖的意义和方式意义：细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一，是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。方式：真核生物的分裂依据过程不同有三种方式，有有丝分裂，无丝分裂，减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、真菌等一切真核生物中的一种zui为普遍的分...
预染蛋白Marker和未预染蛋白Marker有哪些不一样
2021-07-27 在Western实验中，蛋白Marker可以监控蛋白质在SDS-PAGE中的迁移，监控蛋白的转膜效率，确定蛋白分子量大小。选择正确的蛋白Marker是westernblot实验成功的条件之一。蛋白Marker分为两种：一种是未预染的Marker，即宽分子量蛋白标准，高分子量蛋白标准及低分子量蛋白标准；另一种是预染的Marker，即单色预染和多色预染。一、未预染蛋白Marker未预染的蛋白Marker是简单，也是最准确的一种，由于没有附带染料分子或者标记大小正好是蛋白原本的大小...
如何避免胎牛血清使用时出现黑点
2021-06-27 在细胞培养过程中，经常加入5%-20%的Gibco胎牛血清，最常使用的Gibco胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱，影响后续实验的结果，我们在实验中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培养293T细胞，效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清，要根据具体细胞选择合适的Gibco胎牛血清浓度。为防止客户由于操作方面而使黑点生成的办法。对此一定要做好以下几点。方可使细胞培养顺利。（1）尽可能地减少血清冻融次数。（...
这样做能防止胎牛血清产生沉淀
2021-05-30 沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性，不会影响产品性质。要除去沉淀，离心血清(400g，1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部，将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以，使用产品时要摇动并加热血清至37℃，沉淀会自然消失。如何避免胎牛血清中产生沉淀?按如下操作可避免沉淀的产生：(1)解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。(2)血清分装冻...

共 248 条记录，当前 23 / 31 页首页上一页下一页末页跳转到第页