凋亡双染实验常见问题及解决方案:荧光补偿、背景干扰与假阳性
2025-07-15
凋亡双染(AnnexinV-FITC/PI)是检测细胞凋亡的经典方法,广泛应用于肿瘤研究、药物筛选、免疫学等领域。然而,实验过程中常遇到荧光补偿不当、背景干扰高、假阳性等问题,影响数据准确性。本文系统分析这些问题的成因,并提供优化方案,帮助研究者获得更可靠的实验结果。1.荧光补偿问题1.1问题表现荧光信号重叠:FITC(绿色)和PI(红色)的发射光谱部分重叠,导致流式细胞仪检测时信号串扰。补偿不足或过度:补偿设置不当会导致假阳性或假阴性结果,如早期凋亡细胞(AnnexinV+...