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介绍重组肠激酶的使用注意事项
2022-04-24 重组肠激酶（Enterokinase,lightchain）是一种高度专一性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。它可以将胰蛋白酶原转变为胰酶，也可以将带有这个识别序列的融合蛋白切开。由于肠激酶具有高度专一性，水解效率高的特点，它被广泛地应用于基因工程产品的开发，其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂，尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。肠激酶具有高度专一性，水解效率高的特点，它被广泛地应...
细胞冻存液分类与选择
2022-04-24 细胞冻存是细胞生物学研究及药物研发细胞实验中需要经常面对的常规操作。随着细胞越来越娇，人工越来越贵，各种细胞冻存液应运而生，如何从名目繁多的细胞冻存液中选择变成一个问题。本文从细胞冻存液分类，应用场景，使用效果等多方面加以阐释，希望能对如何选择细胞冻存液有所助益。一、细胞冻存液的分类从成分划分（1）渗透性和非渗透性渗透性保护剂分子量小可渗透到细胞内，如甘油、DMSO、乙二醇等，其在细胞冷冻存*凝固之前，渗入细胞内，降低细胞内外溶液中的电解质浓度，阻止细胞内水分外渗，避免细胞过...
细胞冻存液原理及配制方法
2022-04-22 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。细胞冻存是细胞培养、引种、保种和保证实验顺利进行的重要技术手段。在细胞建株和建系中，及时冻...
PEI转染试剂是非常有潜力的非病毒质粒载体试剂
2022-03-28 分子生物学的发展使得大量致病基因被鉴定，科学家在这些研究成果的基础上发展了基因治疗。基因治疗是利用基因载体将治疗基因导入患者体内，进而表达功能蛋白以达到治疗的目的。基因治疗传递DNA面临的挑战之一是外源治疗基因会被体液和胞外空间的核酸内切酶降解。治疗基因在目标组织中的选择性积累、细胞内化以及从溶酶体逃逸这些问题对所有核酸治疗剂都是需要克服的。DNA必须输送至细胞核以允许获得转录和表达。因此，设计和制备安全高效的基因载体来压缩并且保护治疗基因以免被核酸内切酶降解并延长其在体内的...
基因组DNA提取原理说明
2022-03-24 DNA是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象。所以基因组DNA提取实验是分子生物学最基本实验之一。今天若重介绍基因组DNA提取的原理。在接下来的时间了还会介绍动物基因组DNA的提取步骤。DNA.RNA和核苷酸都是极性化合物，一般都溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂，它们的钠盐比游离酸易溶于水，RNA钠盐在水中溶解度可达40g/L.DNA在水中为10g/L,呈黏性胶体溶液。在酸性溶液中，DNA天然状态的DNA是以脱氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于细...
蛋白酶k的作用主要是降解RNA酶
2022-03-21 蛋白酶，顾名思义，降解蛋白的酶，是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键，用于生物样品中蛋白质的一般降解。在RNA提取中，蛋白酶k的作用主要是降解RNA酶，防止RNA的降解。蛋白酶K广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面。一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶，具有很高的比活性。一般储存在-20°C，避光防潮密闭干燥蛋白酶是所有能够催化分解蛋白质的酶类的统称蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，从林伯氏白色念球菌中纯化得到。该酶...
介绍牛血清白蛋白常见的问题解决方法
2022-01-21 牛血清白蛋白一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中，因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入牛血清白蛋白后，它可能起到保护或载体作用，不少酶类添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。对多数底物牛血清白蛋白而言，牛血清白蛋白可以使酶切更*，并可实现重复切割。在37℃，酶切反应超过1h时，牛血清白蛋白可以使酶更加稳定，因为在不含牛血清白蛋白的反应缓冲液中，许多限制性内切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限...
外泌体通过分子信息传递扮演着重要的角色
2022-01-07 外泌体作为疾病诊断标志物的潜在应用依赖于基于外泌体的药物递送系统的技术突破，要将其用于临床治疗，外泌体的大规模工业化生产面临很大的挑战。外泌体（exosome）是细胞分泌囊泡（extracellularvesicles）的一种亚型，存在于生物体液中，并参与多种生理和病理过程。外泌体被认为是细胞间通信的一种新机制，允许细胞交换蛋白质、脂质和遗传物质。过去，细胞分泌的外泌体一度被认为只是参与废物排泄；现在，随着高通量蛋白质组学和基因组学的发展，外泌体被广泛认为是生物体内细胞间短距...

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