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介绍细胞凋亡形态学的几种检测方法
2021-11-28 细胞凋亡与坏死是两种*不同的细胞凋亡形式，根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别，可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍几种常用的测定方法。根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1、光学显微镜和倒置显微镜（1）未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。（2）染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、...
外泌体的提取主要包括以下几种方式
2021-11-25 外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年，外泌体于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。有关他们分泌和摄取及其组成、“运载...
蛋白酶K的配制标准及保存方法
2021-10-26 蛋白酶K广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面.一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般储存在-20°C,避光防潮密闭干燥。蛋白酶Ｋ主要应用于基因检测中基因抽取，是检测试剂盒生产的重要原料，蛋白酶K产品由于在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白质的能力，因而被广泛应用于制备脉冲电泳的染色体DNA，以及去除DNA和RNA中的核酸酶。现有基因抽提及检测试剂盒中均需配备该酶。蛋白酶K配制标准：20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinaseK)：将2...
使用CCK-8要注意的事项有哪些
2021-10-25 CellCountingKit-8（简称CCK8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。相信做细胞的同学对他都很熟悉，你确定你使用CCK-8试剂的方式是*正确的吗？使用CCK-8要注意的事项有哪些：1.酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰，可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。2.CCK8可以检测大肠杆菌，但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染，以免影响结果。3.当在培养箱内培养时，培养板最外一圈的孔最容易干燥挥发，由于体积不准确而增加误...
胎牛血清与新生牛血清在蛋白组成上的差异有哪些
2021-09-26 胎牛血清（FetalBovineSerum,FBS）是在屠宰怀孕母牛的时候，通过心脏穿刺采取胎牛血获取的血清，因其未与外界环境接触，所以血清内IgG等免疫因子相对含量较少，适合用于免疫类细胞的培养。胎牛血清与新生牛血清在蛋白组成上的差异还是很明显的。首先，胎牛血清总蛋白含量（g/dl）约为2%-4%,新生牛血清约为3.0%-5.0%,成牛血清则高达8%-10%.从蛋白含量上也可以初步判断一个血清是否为胎牛或新生牛血清，蛋白含量越高说明牛龄越大，目前检测蛋白含量是初步检测一项重...
常见的细胞转染技术可分为瞬时转染和稳定转染
2021-08-29 细胞转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮...
一文带你了解关于细胞增殖的知识
2021-08-27 一、什么是细胞增殖细胞增殖是生物体的重要生命特征，细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物，以细胞分裂的方式产生新的细胞，用来补充体内衰老或死亡的细胞。二、细胞增殖的意义和方式意义：细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一，是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。方式：真核生物的分裂依据过程不同有三种方式，有有丝分裂，无丝分裂，减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、真菌等一切真核生物中的一种zui为普遍的分...
预染蛋白Marker和未预染蛋白Marker有哪些不一样
2021-07-27 在Western实验中，蛋白Marker可以监控蛋白质在SDS-PAGE中的迁移，监控蛋白的转膜效率，确定蛋白分子量大小。选择正确的蛋白Marker是westernblot实验成功的条件之一。蛋白Marker分为两种：一种是未预染的Marker，即宽分子量蛋白标准，高分子量蛋白标准及低分子量蛋白标准；另一种是预染的Marker，即单色预染和多色预染。一、未预染蛋白Marker未预染的蛋白Marker是简单，也是最准确的一种，由于没有附带染料分子或者标记大小正好是蛋白原本的大小...

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