技术文章_第(32)页－和元李记（上海）生物技术有限公司

如何避免胎牛血清使用时出现黑点
2021-06-27 在细胞培养过程中，经常加入5%-20%的Gibco胎牛血清，最常使用的Gibco胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱，影响后续实验的结果，我们在实验中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培养293T细胞，效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清，要根据具体细胞选择合适的Gibco胎牛血清浓度。为防止客户由于操作方面而使黑点生成的办法。对此一定要做好以下几点。方可使细胞培养顺利。（1）尽可能地减少血清冻融次数。（...
这样做能防止胎牛血清产生沉淀
2021-05-30 沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性，不会影响产品性质。要除去沉淀，离心血清(400g，1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部，将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以，使用产品时要摇动并加热血清至37℃，沉淀会自然消失。如何避免胎牛血清中产生沉淀?按如下操作可避免沉淀的产生：(1)解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。(2)血清分装冻...
带你了解细胞凋亡检测试剂盒的知识
2021-04-19 细胞凋亡是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。形态学检测是研究细胞凋亡的基本方法。细胞凋亡的形态学变化是多阶段的，起初，细胞间连接和微绒毛消失，细胞体积缩小，胞浆凝缩，内质网变疏松并与胞膜融合，形成一个个空泡，核糖体与线粒体等细胞器聚集，结构尚无明显改变，细胞核内的染色质逐渐凝聚成新月状附在核膜周边，细胞核固缩呈均一的致密物，进而断裂成碎块，此时细胞膜仍保持完整：然后，胞膜及核膜不断出芽、脱落，一个细胞变成数个大小不等的有膜...
液体培养基接种要注意的事项有哪些
2021-02-24 液体培养基，固体培养基的对应词，是微生物或动植物细胞的液状培养基。它具有进行通气培养、振荡培养的优点。在静止的条件下，在菌体或培养细胞的周围，形成透过养分的壁障，养分的摄入受到阻碍。由于在通气或在振荡的条件下，可消除这种阻碍以及增加供氧量，所以有利于细胞生长，提高生产量。液体培养基接种要注意的事项有哪些：①用酒精棉消毒操作台面。将移液器吸头盒放入酒精灯右侧，靠近酒精灯放置。将需要进行液体转接的试管插在试管架上，置于酒精灯左边左手附近。将移液器调至合适的刻度放于右手附近的架子上...
影响细胞培养的环境因素有哪些
2021-02-22 细胞培养（cellculture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个*的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术*的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。细胞培养技术是细胞生...
选用牛血清白蛋白BSA需要考虑哪些问题
2020-12-12 牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分(38g/100ml)，分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白蛋白BSA，又称第五组分...
关于牛血清白蛋白BSA的知识你了解多少
2020-12-10 牛血清白蛋白BSA，又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.430kDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在westernblot中作为Blockingagent。它是牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自...
哪些因素影响了高保真DNA聚合酶的保真度？
2020-10-22 高保真DNA聚合酶的保真度是指准确复制目的模板的结果。具体来说，这涉及到多个步骤，包括读取模板链，选择正确的三磷酸核苷，并将此核苷酸插入3’引物末端的能力。为了区分正确和错误的核苷酸，一些DNA聚合酶具有3’到5’核酸外切酶活性。这种“校正”活性可切除不正确掺入的单核苷酸，并将其替换成正确的核苷酸。高保真PCR使用掺入错误率低且具有校正活性的DNA聚合酶，以保证目的DNA的忠实复制。在设计PCR实验时，你首先要考虑你的应用是否需要高保真聚合酶。如果实验结果依赖于正确的DNA序...

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