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技术文章
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如何储存和解冻胎牛血清才不会使产品质量受损?
2020-08-24
胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。血清是细胞培养中用量大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。如何储存和解冻胎牛血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋...
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溶酶体染色试剂盒是一类荧光成像工具
2020-06-27
溶酶体染色试剂盒对于悬浮细胞,取10~60万细胞,重悬于0.5mL细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红加入0.5mLJC-1染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。在孵育期间,按照每1mLJC-1染色缓冲液(5×)加入4mL蒸馏水的比例,配制适量的JC-1染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。37℃孵育结束后,600g4℃离心3~4分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。溶酶体染色试剂盒是一类荧光成像工具,用来标记亚细胞,细胞器;例如细胞膜、溶酶体、...
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细胞培养中马血清的作用有哪些
2020-06-19
马血清采自健康马血液为原料,封闭系统内无菌采血,微孔过滤而成,性状为澄清液体,无噬菌体、超低内毒素,无溶血无异物无细菌真菌支原体霉形体衣原体等,促细胞生长繁殖效果佳,适用于细胞、组织器官培养、细胞株保藏、单抗研制,是医院、科研院校、动物疫苗、生物制药厂家重要培养基之一。细胞在单纯的培养基中不能存活,在特殊类型的细胞培养中必须提供某些营养物质和生长因子才能是细胞得以生长并维持生长状态。基础培养基常常要添加血清,血清终浓度多为5-20%。特殊用途的血清来源需用经验确定。广泛应用的...
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说一说胎牛血清在细胞培养研究中的重要作用
2020-05-18
胎牛血清采用心脏封闭穿刺的方法采自孕6~8月孕龄的健康母牛腹中的胎牛。通过生物材料合成吸附技术和低温进行前期处理,去除细菌、病毒、支原体、抗体等影响血清质量的因素,然后再在净化车间中进行过滤分装。胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。要说为什么很多细胞培养的科研人都用到胎牛血清,那就不得不说说胎牛血清那极为重要的作用。1.提供维持细...
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ELISA常见的组织样本制备方法
2020-05-15
为了保证ELISA实验数据的可靠性,在收集标本前都必须有一个完整的计划。我们提倡新鲜样品应尽早检测,对收集后一周内检测的样本,及时储存在4℃备用。如有特殊原因需要周期性收集样本,在取材后讲标本及时分装后放在-20℃或-80℃条件下保存。因冰箱与室温有一定温差,蛋白容易降解,直接影响实验质量,故应避免反复冻融。不同的样本请根据实际情况处理。样品制备方法1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再...
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血清中的沉淀物对细胞培养有什么影响?
2020-04-26
细胞生长,我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,我们的客户以及其它血清生产商也证明了这一点。过滤,如果血清中出现大量的沉淀物,血清将很难过滤。一般说来,因为在血清生产时后已经经过100nm或者40nm的过滤处理,并且经过了严格的无菌检测,因此不推荐再过滤用于细胞培养的血清。在实验室中没有必要再过滤处理血清,在大规模的细胞培养中往往将血清直接加到培养基中一起过滤。污染,磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起争端。研究者可能会在血清中观察到一些絮状的沉淀,因此就会比较警觉的去...
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外泌体在胃癌发生发展中的作用与研究
2020-04-16
外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm),现今,其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年,外泌体*于绵羊网织红细胞中被发现,1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。有关他们分泌和摄取及其组成、“运...
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怎么处理牛血清白蛋白的常见问题
2020-03-25
牛血清白蛋白一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入牛血清白蛋白后,它可能起到保护或载体作用,不少酶类添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。对多数底物牛血清白蛋白而言,牛血清白蛋白可以使酶切更*,并可实现重复切割。在37℃,酶切反应超过1h时,牛血清白蛋白可以使酶更加稳定,因为在不含牛血清白蛋白的反应缓冲液中,许多限制性内切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限...