产品描述

LyGreen核酸染料是一种新型的的双链DNA结合饱和荧光染料，是新一代用于HRM分析的荧光染料，也可用于实时定量PCR（qPCR）。该染料结构上由两个单体染料分子通过一个弹性臂连接成一个二聚体，在没有DNA存在时，该结构呈无荧光环状结构，一旦有DNA出现，则恢复随机形态并与DNA结合发出强烈的绿色荧光。
与市场上其他荧光染料如SYBR Green I 相比，LyGreen具有如下优点：（1）灵敏度高：在推荐浓度下使用时可以获得比SYBR Green I 更强的信号（2）准确：结合双链DNA，变形时染料不迁移，荧光信号准确反映双链DNA变化情况。过量染料形成二聚体，而不游离，使得LyGreen对PCR的抑制远小于SYBR Green I，因此，使用LyGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。（3）稳定性好：在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里，也可以反复冻融。（4）安全：细胞膜穿透性测试表明，LyGreen几乎不能穿透细胞膜。（5）兼容性：和SYBR Green I 光谱相似，使用不同品牌qPCR仪器时不需改变光谱元件设置，也无需改变操作步骤，qPCR完成后，无需加入其它核酸染料便能直接在凝胶成像系统下观察分析。（6）重复性好（如图1）：特殊设计染料，相同反应体系下，荧光信号释放仅与双链浓度有关，优秀线性。
应用实例

图1. LyGreen染料用于绵羊FecB基因HRM分析.

HRM分析设备为LightCycler@480荧光定量PCR仪(德国罗氏)
订购信息

运输与保存
蓝冰运输。-20 ºC干燥避光保存，有效期12个月。
光学性质
激发波长= 497 nm
发射波长= 520 nm
使用方法
PCR反应的配制（50 μL）

注意事项

1. 本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

2. 请根据不同的仪器类型，不加入或加入合适浓度的参比染料ROX。该体系需根据所使用的Taq酶的不同进行适当优化。

3. 根据实验用量于冰上向无菌离心管中依次加入水，Taq poLymerase buffer, dNTPs, MgCl₂, LyGreen, Taq poLymerase, and primers等配制qPCR反应体系（1×Master mix）。

4. 将1×Master mix 适量分装至无菌PCR管中，并加入DNA (50 ng/反应)。

5. 按照仪器类型选择合适的扩增程序。

6. 做qPCR时注意设置阳性和阴性对照。

7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。