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技术文章
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高保真DNA聚合酶的定义及如何选择
2022-11-08
DNA聚合酶是PCR反应中*组成部分,是参与DNA复制中的重要酶,被用在生物及医学等领域的各个研究方向上。PCR技术发明至今40多年的时间里,从早期被发现的TaqDNA聚合酶到现在,酶越来越多样化。随着新酶的发现和对旧酶的改造,DNA聚合酶的保真性、特异性、灵敏度等都获得了明显的改进。而高保真DNA聚合酶的出现正是顺应了市场需求,下面小编将围绕高保真DNA聚合酶的作用原理和应用方向等进行介绍。一、什么是什么是高保真酶高保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心,聚合中心具有5'→3...
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李记生物细胞转染试剂常见问题(一)
2022-11-07
涉及产品EZTransPlus细胞转染试剂(Ⅱ)货号:AC04L011EZTrans细胞转染试剂(高效)货号:AC04L091/AC04L092EZTrans细胞转染试剂(低毒)货号:AC04L098/AC04L099其他转染产品EZTransPro细胞转染试剂(GMP)货号:AC04L032/AC04L033/AC04L034EZTransRNA转染试剂货号:AC04L051李记生物细胞转染试剂常见问题(一)Q1:李记有3款转染试剂,这3款有什么区别?和Li**对比效果如何...
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细胞冻存是细胞保存的主要方法之一
2022-10-31
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO),可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透...
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MH培养基的原理及用法
2022-10-20
MH培养基为MH琼脂培养基,微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母缩写,指的是水解酪蛋白。所以MH培养基也成为水解酪蛋白培养基。常用作培养基原材料,提供细菌生长所需的生长因子。MH培养基的原理:牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、维生素和氨基酸;可溶性淀粉吸收有毒的代谢产物。MH培养基的成分:酸水解酪蛋白/酸水解酪素17.5g牛肉浸膏粉2g淀粉1.5g琼脂12gMH培养基的用法:称取本品21.0g,加热溶解于1000ml?蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。...
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介绍几种常见的细胞转染方法
2022-09-28
细胞转染技术主要分为三大类:化学法、物理法及生物学法。但是没有一种方法是放之四海而皆准的,即没有任何方法适用于所有细胞和所有实验。因而只有依据自己的实验要求选择理想的方法,才能获得漂亮的实验结果。下面介绍几种常见的细胞转染方法:1、DEAE-右旋糖苷法常言道:同性相斥,异性相吸。因而,当带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸中带负电的磷酸骨架相遇,妥妥的火花四射,而后会被细胞膜抱团相拥并通过细胞内吞作用迎客到家。该法可用于瞬时转染,操作相对简单、结果可重复,但是对细胞有一定的毒副作...
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分析影响细胞转染效率的因素
2022-09-27
细胞转染指的是将外源分子如DNA、RNA等导入到真核细胞内部的技术。随着基因和蛋白功能研究的深入,转染已经成为科研实验中常用的技术手段之一。对于细胞转染实验,转染试剂、转染方法、细胞状态等都会影响到细胞转染的效率,本文主要对影响细胞转染效率的8个因素做一介绍。1.转染试剂瞬时转染和稳定转染可以选择不同的转染试剂,转染试剂的选择又可以根据已经发表的文献,已经有很多细胞株被成功转染,通过文献资料可以参考最适的转染试剂,当然也要根据不同的实验需求选择。一般来说转染试剂的要求是低毒,...
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胎牛血清使用中的常见问题解答
2022-09-19
1、如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。2、血清中包含絮状...
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提高细胞转染效率的方法有哪些?
2022-09-15
转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。分为物理介导方法:电穿孔法、显微注射和基因枪;化学介导方法:如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法:有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术,是目前转染效率较高的方法,同时具有细胞毒性很低的优势。但是病毒转染方法的准备程序复杂,常常对细胞类型有很强的选择性,在一般实验室中很难普及。其它物理和化...