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当前位置:首页产品中心PCR&q-PCRPCRAN11L818/AN11L8192 x Taq PCR Master Mix

2 x Taq PCR Master Mix

产品简介

2 x Taq PCR Master Mix含有 Loading Dye,PCR 产物需经过切胶回收后才可充分去除 Loading Dye。

产品型号:AN11L818/AN11L819
更新时间:2025-06-11
厂商性质:生产厂家
访问量:3524
详细介绍在线留言
品牌其他品牌货号AN11L818/AN11L819
规格2 * 1mL供货周期现货
主要用途主要用于基因组 DNA 靶序列和 RNA 反转录后 cDNA 靶序列的定性检测。应用领域生物产业

2 x Taq PCR Master Mix

产品描述

2 x Taq PCR Master Mix 是PCR 反应预混液,其中包含Taq DNA Polymerase、dNTPs、反应缓冲液、loading Dye 等成分,使用时只需取适量本产品,加入模板和引物,并加入 ddH2O 补足体积,使反应体系浓度为 1× 即可进行 PCR 反应。本产品最长可扩增 5kb DNA片段,具有良好的扩增特异性和模板兼容性, PCR 产物 3' 端带突出 A 碱基,纯化后可直接用于 T/A 克隆。

本产品中包含两种染料,PCR反应完成后无需额外添加 loading buffer,可以直接进行电泳,且电泳过程中会出现两个指示条带。该染料不影响 PCR 扩增效率,但对于需要对 PCR 产物进行吸光度、荧光等光学分析的实验,建议在分析前对 PCR 产物进行纯化,或使用无染料的PCR预混液。


订购信息

产品名称

货号

规格

2 x  Taq PCR Master Mix

AN11L818

2*1mL

2 x  Taq PCR Master Mix

AN11L819

5*1mL


运输与保存

蓝冰运输。-20℃保存,有效期24个月。


使用方法

1.       常规 PCR 反应体系

组分

20 μL体系

50 μL体系

终浓度

2 x  Taq PCR Master Mix

10 μL

25 μL

1 x

正向引物(10 μM)(1)

0.4-0.8 μL

1-2 μL

0.2-0.4 μM

反向引物(10 μM)(1)

0.4-0.8 μL

1-2 μL

0.2-0.4 μM

DNA 模板(2)

X μL

X μL

-

ddH2O

To 20 μL

To 50 μL

-

(1)       引物推荐终浓度为 0.2~0.4 μM,效果不佳时可以在 0.1~1 μM 浓度范围内进行调整;  

(2)       不同模板最佳反应浓度有所不同,以 50 μL 体系为例:模板为基因组 DNA 时,一般推荐的使用量为 10~400 ng;当模板为质粒或病毒 DNA 时,一般推荐的使用量为 10 pg~20 ng。

2.       常规 PCR 反应程序

步骤

温度

时间

预变性(1)

95℃

3~5 min

变性

95℃

30 sec

退火

53~65℃

30 sec

延伸(2)

72℃

30~60 sec/kb

 

30~35 Cycles

终延伸

72℃

5min







(1)       该预变性条件适合绝大多数扩增反应, 对于一些复杂模板, 例如:菌液、菌落(尤其是酵母)的PCR 扩增,预变性时间可适当延长至 10 min,以提高预变性效果;

(2)       关于延伸速率,当目的片段长度不超过 3 kb 时,推荐使用 30 sec/ kb;当目的片段长度大于 3 kb 时,推荐使用 60 sec/kb。

 

3.       凝胶浓度对应的染料迁移距离

琼脂糖凝胶浓度

金色条带

蓝色条带

0.8%

~80 bp

4000 bp

1.0%

~40 bp

2000 bp

1.5%

~20 bp

1500 bp

2.0%

<10 bp

1200 bp

2.5%

<10 bp

1200 bp

3.0%

<10 bp

1200 bp

注:染料会影响吸光度。

 

注意事项

1.   本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

2.    本产品在短期 -20℃ 储存时不会凝固,可以随取随用,如遇储存温度波动,体系结冰为正常现象不影响使用。

3.   建议将所有的反应组分在冰上配制,最后加入2 x  Taq PCR Master Mix。

4.  使用基因组模板进行较长片段扩增需要使用高质量纯化的DNA模板,可以提高 PCR 成功率。

5.  本产品扩增产物可用于 T/A 克隆。由于本产品含有 Loading Dye,PCR 产物需经过切胶回收后才可充分去除 Loading Dye。

 

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